[发明专利]两片段连接法进行HBV全基因组克隆的方法无效
| 申请号： | 201110353382.2 | 申请日： | 2011-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN102559657A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 徐东平;刘研;许智慧;王耀;李晓东;钟彦伟;戴久增;王琳 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三〇二医院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 张涛 |
| 地址： | 100039 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 采用两片段连接法进行HBV全基因组克隆的方法，先将HBV DNA进行巢式PCR反应，然后分别对扩增出的HBV CS区和pSX区两个片段进行酶切，并将两个酶切片段连接，以此连接产物为模板用PCR方法扩增该全基因组后进行克隆。所述CS区为HBV基因组的nt 1821～nt 272，pSX区为nt 3194～nt 1825。 | ||
| 搜索关键词： | 片段 连接 进行 hbv 基因组 克隆 方法 | ||
【主权项】：
一种采用两片段连接法进行HBV全基因组克隆的方法，先将HBV的DNA进行巢式PCR反应，然后分别对扩增出的HBV CS区和pSX区两个片段进行酶切，并将两个酶切片段连接，以此连接产物为模板用PCR方法扩增该全基因组后进行克隆；其特征为：所述CS区为HBV基因组的nt 1821～nt 272，pSX区为nt 3194～nt 1825；且进行巢式PCR反应时所用特异性引物的序列如下：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：3是CS区的外引物序列；SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：4是pSX区的外引物序列；SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：7是CS区的内引物序列；SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：8是pSX的内引物序列。
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