[发明专利]甘蔗GH32家族可溶性酸性转化酶(SoINV)基因及其蛋白序列无效
申请号: | 201110365748.8 | 申请日: | 2011-11-17 |
公开(公告)号: | CN102505021A | 公开(公告)日: | 2012-06-20 |
发明(设计)人: | 王爱勤;牛俊奇;刘铭;杨丽涛;李杨瑞 | 申请(专利权)人: | 广西大学 |
主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N15/10;C12N9/24 |
代理公司: | 广西南宁汇博专利代理有限公司 45114 | 代理人: | 邹超贤 |
地址: | 530004 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明公开了一种GH32家族甘蔗可溶性酸性转化酶(SoINV)基因及其蛋白序列,在对所有植物可溶性酸性转化酶基因全长序列进行进化分析的基础上,以同一家族的可溶性酸性转化酶基因序列的保守区设计引物,从甘蔗幼嫩叶片提取总RNA,并经反转录,用常规PCR法扩增,结合RACE PCR技术克隆到甘蔗可溶性酸性转化酶基因家族三个成员的全长cDNA序列,不仅为研究甘蔗可溶性酸性转化酶的转录和表达机制,进一步探讨蔗糖的积累机理奠定基础,而且通过氨基酸序列可以获得具有生物活性的纯化蛋白,解决了糖基水解酶(glycosyl hydrolase familie)GH32基因家族中甘蔗INV基因目前只克隆出一些cDNA序列片段,没有获得全长核苷酸序列的技术难点,为研究可溶性酸性转化酶的生物学功能提供基础。 | ||
搜索关键词: | 甘蔗 gh32 家族 可溶性 酸性 转化 soinv 基因 及其 蛋白 序列 | ||
【主权项】:
一种甘蔗GH32家族可溶性酸性转化酶(SoINV)基因及其蛋白序列,其特征在于:对所有植物可溶性酸性转化酶基因全长序列进行进化分析的基础上,比对同一家族的可溶性酸性转化酶基因cDNA序列,并设计扩增SoINV基因核心片段的引物,从甘蔗幼嫩叶片提取总RNA,并经反转录,用常规PCR法扩增SoINV基因核心片段;然后在核心片段序列5′端设计若干对特异引物,在核心片段序列3′端设计一个特异引物和两个锚定引物,通过RACE PCR技术分别扩增到SoINV基因核心区的5′端三个不同序列片段和3′端一个序列片段,将三个5′端序列分别与核心区、3′端序列和AY302083片段进行拼接,获得甘蔗GH32家族三个可溶性酸性转化酶(SoINV)基因全长cDNA序列,分别记为SoINV1、SoINV2和SoINV3。
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