[发明专利]一种缨小蜂体内共生沃尔巴克氏细菌的检测方法无效
| 申请号： | 201110368959.7 | 申请日： | 2011-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN102443635A | 公开（公告）日： | 2012-05-09 |
| 发明（设计）人： | 吕仲贤;汤江武;徐红星;王新;郑许松;刘淑平;杨亚军 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 向庆宁 |
| 地址： | 310021 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供一种缨小蜂体内共生菌沃尔巴克氏细菌群的检测方法，具体包括以下几个步骤：提取缨小蜂样品的总DNA，采用巢式PCR扩增缨小蜂样品中沃尔巴克氏细菌、总细菌和除沃尔巴克氏细菌外总细菌的16SrDNAV3高变区的基因片段，然后进行DGGE（变性梯度凝胶电泳）分析，通过DGGE图谱的分析和DGGE条带的回收、克隆和测序分析，可以检测缨小蜂样品中的沃尔巴克氏细菌。该方法提供了一种相对严谨的基于PCR的检测缨小蜂体内沃尔巴克氏细菌的技术方法，还可以快速、准确的确定缨小蜂体内沃尔巴克氏细菌的种类，对当前昆虫体内共生沃尔巴克氏细菌的检测和相关研究具有重要促进意义和实用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 缨小蜂 体内 共生 巴克 细菌 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种缨小蜂体内共生沃尔巴克氏细菌的检测方法，包括： 提取缨小蜂总DNA； 扩增沃尔巴克氏细菌和细菌16S rDNA基因片段 对获得沃尔巴克氏细菌和细菌16S rDNA基因片段进行变性梯度凝胶电泳分析； 其特征在于：所述沃尔巴克氏细菌和细菌16S rDNA基因片段的扩增采用巢式PCR，其具体步骤为：（1）、以提取获得的缨小蜂DNA为模板，用沃尔巴克氏细菌的16S rDNA引物99F/994R或者315F/628R扩增获得相应的基因片段，用细菌的16S rDNA引物27F/1492R和27F/REUB分别扩增获得缨小蜂体内总细菌和不含沃尔巴克氏细菌的总细菌的相应基因片段。
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