[发明专利]鸭疫里默氏杆菌特异性PCR检测方法

摘要

本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌PCR检测方法，包括如下步骤：根据鸭疫里默氏杆菌基因组DNA序列中gyrB基因的保守序列SEQ ID NO：1设计扩增引物；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电泳检测扩增产物，判断样品是否含有鸭疫里默氏杆菌；所述判断具体为：如果电泳结果出现相应的单一扩增条带，则说明样品中含有鸭疫里默氏杆菌；如果没有出现相应的单一扩增条带，则样品中不含该菌。采用本发明的检测方法检测鸭疫里默氏杆菌，检测时间短，成本底，检测结果特异，结果判定简单。

主权项

一种鸭疫里默氏杆菌PCR检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，根据鸭疫里默氏杆菌的基因组DNA序列中gyrB基因的保守序列SEQ ID NO：1设计扩增引物：所述引物为：正向引物序列如SEQ ID NO：2所示；反向引物如SEQ ID NO：3所示；步骤二，提取样品DNA，PCR法扩增；PCR检测体系具体为：25μL反应体系具体为，10×PCR缓冲液2.5μL，25mmol/L的Mg 2.0μL，2.5mmol/L的dNTP 1.0μL，Taq酶0.25‑1U，5μM引物对1μL，模板2‑5μL，最后用双蒸水补至25μL；PCR检测反应程序：先95℃预变性5min，之后开始扩增循环，每个循环的程序为：95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s；30个循环结束后，72℃延伸10min，降温至12℃，结束；步骤三，凝胶电泳检测扩增产物，判断样品是否含有鸭疫里默氏杆菌；所述判断具体为：如果电泳结果出现相应的单一扩增条带，则说明样品中含有鸭疫里默氏杆菌；如果没有出现相应的单一扩增条带，则样品中不含有鸭疫里默氏杆菌。