[发明专利]小麦中几种真菌毒素含量的检测方法

摘要

本发明涉及一种对小麦中几种真菌毒素含量的检测方法，是利用高效液相色谱串联质谱的方法检测小麦中的真菌毒素，检测中涉及的几种真菌毒素为DON、3-Ac-DON、15-Ac-DON、ZEN和T-2毒素，具体检测方法是：把小麦样品用粉碎机磨细，通过提取液获得粗提液；通过氨基柱获得净化后的毒素提取液；配制含量不同的混合毒素标准液；采用高效液相色谱串联质谱的方法检测毒素提取液中各种不同的真菌毒素；最后根据混合毒素标准液的检测结果得出毒素浓度对于峰面积的回归方程，计算出小麦样品中DON、3-Ac-DON、15-Ac-DON、ZEN和T-2毒素的含量。

主权项

一种小麦中几种真菌毒素含量的检测方法，是利用高效液相色谱串联质谱的方法检测小麦中的真菌毒素，其特征在于：检测中涉及的几种真菌毒素为镰刀菌属的脱氧雪腐镰刀菌烯醇DON、3‑乙酰基‑脱氧雪腐镰刀菌烯醇3‑Ac‑DON、15‑乙酰基‑脱氧雪腐镰刀菌烯醇15‑Ac‑DON、玉米赤霉烯酮ZEN和T‑2毒素，采用的毒素标准液为含有DON、3‑Ac‑DON、15‑Ac‑DON、ZEN、T‑2毒素的混合毒素标准液，具体检测方法是：a) 将小麦样品用高速万能粉碎机磨细并通过1mm孔径试验筛，称取10.00 g麦粉置于250 mL三角瓶中，加入50.0 mL的提取液，室温摇床200 r/min 振荡30分钟, 于室温6000 r/min离心5分钟，收集上清，得到粗提液；b) 将氨基柱用3 mL的提取液进行预平衡，当溶剂液面到达氨基柱吸附层表面时，立即准确移入5.0 mL粗提液，用离心管收集过氨基柱的提取滤液，再用2 ml的提取液（乙腈+水，体积比为80：20）洗脱，收集洗脱的滤液，把提取滤液和洗脱的滤液合并，置于氮吹仪上，水浴温度50℃吹干，然后加入洗脱液，定容至5.0 mL，得到净化后的毒素提取液；c) 混合毒素标准液的配制：把DON、3‑Ac‑DON、15‑Ac‑DON、ZEN、T‑2毒素的标准品用洗脱液配置成7种毒素含量不同的混合毒素标准液，每个混合毒素标准液中的DON、3‑Ac‑DON、15‑Ac‑DON、ZEN毒素浓度相同，由高到低依次为1000 ng/ml、500 ng/ml、200 ng/ml、100 ng/ml、50 ng/ml、20 ng/ml和10 ng/ml， T‑2毒素的浓度依次为50 ng/ml、25 ng/ml、10 ng/ml、5 ng/ml、2.5 ng/ml、1.0 ng/ml和0.5 ng/ml；d) 采用高效液相色谱串联质谱的方法检测毒素提取液中各种不同的真菌毒素； e) 真菌毒素含量计算：根据混合毒素标准液的检测结果得出毒素浓度对于峰面积的回归方程，计算出小麦样品中DON、3‑Ac‑DON、15‑Ac‑DON、ZEN和T‑2毒素的含量。