[发明专利]一种快速提取禽类血液基因组DNA的方法无效
申请号: | 201110394603.0 | 申请日: | 2011-12-01 |
公开(公告)号: | CN102690805A | 公开(公告)日: | 2012-09-26 |
发明(设计)人: | 张小辉;祁艳霞;王锐;赵淑娟;庞有志 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
地址: | 471003 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明涉及一种快速提取禽类血液基因组DNA的方法,包括以下步骤:(1)取抗凝血,将其与细胞裂解液混合形成混合液,向混合液中加入蛋白酶K;(2)在55-65℃的温度下,水浴消化3-5小时;(3)加预冷的乙醇,充分混匀;(4)加双蒸水ddH2O溶解沉淀;10000rpm离心5min,吸上清液到干净的离心管中;(5)加入4mol/L的NaAc和预冷的乙醇,充分混匀;10000rpm离心5min,弃上清液,加75%的预冷乙醇,出现白色絮状沉淀,即基因组DNA。本方法进行禽血基因组DNA提取主要试剂是乙醇,没有用到酚、氯仿、异戊醇等有毒有害试剂,对操作者和环境都没有污染。另外,提取方法简单,结果可靠,采用本发明的方法的提取过程所需要时间在1h以内。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 提取 禽类 血液 基因组 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种快速提取禽类血液基因组DNA的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)取抗凝血,将其与细胞裂解液混合形成混合液,向混合液中加入蛋白酶K;(2)在55‑65℃的温度下,水浴消化3‑5小时;(3)加预冷的乙醇,充分混匀,乙醇使溶液中的DNA和部分蛋白一起沉淀;10000rpm离心5min,弃上清液;(4)加双蒸水ddH2O溶解沉淀;10000rpm离心5min,吸上清液到干净的离心管中;(5)加入4mol/L的NaAc和预冷的乙醇,充分混匀;10000rpm离心5min,弃上清液,加75%的预冷乙醇,出现白色絮状沉淀,即基因组DNA。
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