[发明专利]农杆菌介导的玉米成熟种子胚的转基因方法无效
| 申请号： | 201110399284.2 | 申请日： | 2012-01-05 |
| 公开（公告）号： | CN102433356A | 公开（公告）日： | 2012-05-02 |
| 发明（设计）人： | 李有志;潘虹;樊宪伟 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 黄永校 |
| 地址： | 530004 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 一种农杆菌介导的玉米成熟种子胚的基因转化方法，包括如下步骤：(1)构建植物基因表达的质粒载体；(2)构建含有步骤(1)中植物基因表达的质粒载体的根癌农杆菌菌株；(3)玉米成熟种子的裸露的胚的制备和创伤；(4)步骤(2)中的农杆菌介导的裸露并且经创伤的玉米成熟种子胚的基因转化；(5)再生苗的除草剂抗性复筛；(6)除草剂筛选处理后存活的苗移栽；(7)玉米转基因植株的聚合酶链式反应(PCR)鉴定。本发明避免了玉米愈伤组织组织分化和植株再生周期长和再生根难的问题；有效避开了已报道的玉米幼胚为受体的转基因操作的季节的限制、缩短了转化操作时间。 | ||
| 搜索关键词： | 杆菌 玉米 成熟 种子 转基因 方法 | ||
【主权项】：
一种农杆菌介导的玉米成熟种子胚的基因转化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)构建植物基因表达的质粒载体；(2)构建含有步骤(1)中植物基因表达的质粒载体的根癌农杆菌菌株；(3)玉米成熟种子的裸露的胚的制备和创伤；(4)步骤(2)中的农杆菌介导的裸露并且经创伤的玉米成熟种子胚的基因转化；(5)再生苗的除草剂抗性复筛；(6)除草剂筛选处理后存活的苗移栽；(7)玉米转基因植株的聚合酶链式反应(PCR)鉴定。
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