[发明专利]下呼吸道病原菌的多重降落PCR检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明设计了肺炎链球菌、b型流感嗜血杆菌与结核分枝杆菌复合群的特异性引物，并建立了可同时检测这些细菌的多重降落PCR检测试剂盒及检测方法，采用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。所述试剂盒包括：10×PCR缓冲液，MgCl2，dNTP，TaqDNA聚合酶，BSA，肺炎链球菌、b型流感嗜血杆菌与结核分枝杆菌复合群阳性对照DNA，肺炎链球菌引物，b型流感嗜血杆菌引物和结核分枝杆菌复合群引物。该试剂盒可同时快速检测下呼吸道标本中肺炎链球菌（Streptococcuspneumoniae）、b型流感嗜血杆菌（Haemophilusinfluenzaetypeb）与结核分枝杆菌复合群（Mycobacteriumtuberculosiscomplex）。本发明建立的多重降落PCR检测试剂盒及检测方法快速、简便、特异、灵敏，可用于肺炎链球菌、b型流感嗜血杆菌与结核分枝杆菌复合群感染的快速诊断与流行病学调查。

主权项

一种下呼吸道病原菌多重降落PCR检测试剂盒，包括：10×PCR缓冲液，MgCl2，dNTP，Taq DNA聚合酶，BSA，肺炎链球菌、b型流感嗜血杆菌与结核分枝杆菌复合群阳性对照DNA，肺炎链球菌引物，b型流感嗜血杆菌引物和结核分枝杆菌复合群引物；所述肺炎链球菌引物序列为：5’‑ AGTGGTAACTGCGTTAGTCCTA‑3’与5’‑ GTGGCGTTGTGGTCAAGAG ‑3’；所述b型流感嗜血杆菌引物序列为：5’‑ ATGTTAGATCGTGCGGATACTC‑3’与5’‑ GCGAGGAACAGAACCATCAG‑3’；所述结核分枝杆菌复合群引物序列为：5’‑ GGTAGCAGACCTCACCTATGT‑3’与5’‑ CTCTGGCGTTGAGCGTAGTA‑3’。