[发明专利]水产品中金黄色葡萄球菌的双重PCR-DHPLC检测方法有效
| 申请号： | 201110402451.4 | 申请日： | 2011-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN102399897A | 公开（公告）日： | 2012-04-04 |
| 发明（设计）人： | 周向阳;万婧;沈飚;胡兴娟;邵宏宏;张静;颜建波 | 申请（专利权）人： | 中华人民共和国舟山出入境检验检疫局 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/14;G01N30/02;C12R1/445 |
| 代理公司： | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人： | 袁忠卫;景丰强 |
| 地址： | 316000 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 一种水产品中金黄色葡萄球菌的双重PCR-DHPLC检测方法，其特征在于包括如下步骤：①金黄色葡萄球菌培养，将待测水产样品与增菌液混合，进行培养；②金葡菌基因组DNA的提取；③引物的设计：④以金葡菌基因组DNA为模板，进行双重PCR扩增；⑤PCR产物的DHPLC检测，得到DHPLC峰型图谱，供分析鉴定。整体检测方法简化了反应的条件，提高了检测的灵敏度，且操作更加简便，达到了高通量的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 水产品 金黄色 葡萄球菌 双重 pcr dhplc 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种水产品中金黄色葡萄球菌的双重PCR‑DHPLC检测方法，其特征在于包括如下步骤：①金黄色葡萄球菌培养，将待测水产样品与增菌液混合，进行培养；②金葡菌基因组DNA的提取；③引物的设计：根据Genbank中金葡菌的sea和nuc基因序列，利用Primer5.0软件设计2对特异性引物，如下：sea‑F：5’‑AGTCTGAATTGCAGGGAAC‑3’，sea‑R：5’‑CACCACCATACATACAAGC‑3’；nuc‑F：5’‑CTTGCTATGATTGTGGTAGC‑3’，nuc‑R：5’‑CTAGCAAGTCCCTTTTCCAC‑3’；④以金葡菌基因组DNA为模板，进行双重PCR扩增；⑤PCR产物的DHPLC检测，得到DHPLC峰型图谱，供分析鉴定。
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