[发明专利]一种广谱抗植物病毒的转基因植物的制备方法及应用无效
申请号: | 201110402593.0 | 申请日: | 2011-12-07 |
公开(公告)号: | CN102492719A | 公开(公告)日: | 2012-06-13 |
发明(设计)人: | 陈士云;张勇;杨宝玉 | 申请(专利权)人: | 中国科学院武汉病毒研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/31;A01H4/00;A01H5/00 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430071*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种广谱抗植物病毒的转基因植物的制备方法及应用,其步骤是:a.转化载体的构建:将苏云金芽孢杆菌的aiiA基因用限制性内切酶酶切后连接到植物双元转化载体pA8上,通过冻融法将连接好的植物双元转化载体pA8-aiiA转入农杆菌菌株EHA105中;b.植物遗传转化:通过叶盘转化方法分别转化珊硒烟草和本生烟草,在含有潮霉素的MS培养基上筛选获得转化苗,通过生根培养基获得完整的再生植物,包括转化空载体的pA8再生植物以及转化pA8-aiiA的再生植物。方法易行,操作简便,增强对不同植物病毒的广谱抗性,将可广泛应用于经济作物的病毒病防治。 | ||
搜索关键词: | 一种 广谱 植物 病毒 转基因 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种广谱抗植物病毒的转基因植物的制备方法,其步骤是:a. 转化载体的构建: 将苏云金芽孢杆菌的aiiA基因用限制性内切酶酶切后连接到植物双元转化载体pA8上,通过冻融法将连接好的植物双元转化载体pA8‑aiiA转入农杆菌菌株EHA105中;b. 植物遗传转化:通过叶盘转化方法分别转化珊硒烟草和本生烟草,在含有潮霉素的MS培养基上筛选获得转化苗,通过生根培养基MS 获得完整的再生植物,包括转化空载体的pA8再生植物以及转化pA8‑aiiA的再生植物;所述的MS培养基为:MS + 1.0 mg/L BA + 0.1 mg/L NAA + 30 mg/L Hygromycin + 100 mg/L Timentin;所述的生根培养基为MS + 0.1 mg/L NAA + 30 mg/L Hygromycin + 100 mg/L Timentin。
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