[发明专利]一种从成体兔的成熟脂肪细胞诱导分化为心肌样细胞的方法有效

专利信息
申请号: 201110404788.9 申请日: 2011-12-08
公开(公告)号: CN102492653A 公开(公告)日: 2012-06-13
发明(设计)人: 张传森;李晓童;张喜 申请(专利权)人: 中国人民解放军第二军医大学
主分类号: C12N5/077 分类号: C12N5/077;C12N5/071
代理公司: 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 代理人: 赵青
地址: 200433 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及细胞生物学去分化及诱导分化的技术领域。去分化的脂肪细胞(DFAT)可从白色脂肪组织中获取,DFAT细胞通过一定的诱导培养方法可以分化为多种间质细胞系,具有成骨、成脂、成软骨、成肌的能力。本发明的目的是从成体兔的成熟脂肪细胞培养兔的DFAT,并诱导分化为心肌样细胞。本发明选用成体兔的白色脂肪组织,通过胶原酶I等体积消化,并采用20%完全培养基,天花板培养的方法使成熟的脂肪细胞去分化为DFAT细胞,并有心肌细胞的形态及标识分子的表达。本发明为组织工程提供了种子细胞,为基础研究带来便捷,为临床应用带来前景。
搜索关键词: 一种 成体 成熟 脂肪 细胞 诱导 化为 心肌 方法
【主权项】:
一种从成体兔的成熟脂肪细胞诱导分化为心肌样细胞的方法,具体步骤如下:A、分离出成体兔的白色脂肪组织;B、酶消化法获得上层白色脂肪层部分;C、采用天花板法培养后再常规培养;用20%完全培养基或者5%的完全培养基,中和胶原酶I并过滤,收集过滤液1000‑1500rpm离心3‑5min;D、取上层白色细胞层采用20%的完全培养基倒置培养至少七天后常规培养;所述的完全培养基配方为FBS、高糖培养基和1%抗青霉素‑链霉素。
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