[发明专利]一种提取河蟹绒毛DNA的方法有效
| 申请号： | 201110413783.2 | 申请日： | 2011-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN102424820A | 公开（公告）日： | 2012-04-25 |
| 发明（设计）人： | 王成辉;周陆;王军 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201306 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提取河蟹DNA的方法，其步骤包括：(1)绒毛剪取：剪取中华绒螯蟹螯足(蟹钳)上的绒毛少许，去离子水清洗两遍；(2)绒毛DNA提取：配制裂解缓冲液后，进行绒毛消化，离心，加饱和NaCl溶液和氯仿，离心，加异丙醇，离心沉淀DNA，洗涤，离心后烘干，加去离子水或TE溶液保存DNA。本发明方法可简便、快速、有效的提取河蟹绒毛DNA，提取的DNA质量高，不受蛋白质的污染，提取的绒毛DNA可用于分子生物学分析，从而为河蟹的遗传多样性研究、种质保护和资源利用提供一项技术手段，具有重大科学意义和实用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提取 河蟹 绒毛 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种提取河蟹DNA的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)剪取河蟹绒毛；(2)提取河蟹绒毛DNA，步骤如下：a.将第(1)步剪取的河蟹绒毛加裂解缓冲液和蛋白酶K进行消化，其中裂解缓冲液的成分与浓度为：0.05M EDTA，2％SDS，0.01M Tris‑Cl，0.3M乙酸钠，10mg/ml DTT；b.将步骤a得到的消化液离心，取上清液加饱和NaCl溶液和氯仿，混匀；c.离心，取上清液加入异丙醇；d.离心沉淀DNA；e.洗涤DNA，轻摇混匀；f.离心，将沉淀DNA烘干；g.在烘干后的DNA加去离子水或TE溶液，并加入RNA酶去除DNA中的RNA，保存备用。
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