[发明专利]一种重组中华田园犬α干扰素的制备方法无效
| 申请号： | 201110415960.0 | 申请日： | 2011-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN102492714A | 公开（公告）日： | 2012-06-13 |
| 发明（设计）人： | 张鑫宇;孙怀昌;朱善元;刘文俊;巢亦成;王健 | 申请（专利权）人： | 江苏畜牧兽医职业技术学院 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K14/56;C07K1/14;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 224300*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种重组犬α干扰素（CaIFNα）的制备方法。该方法将PCR扩增出的无信号肽中华田园犬α干扰素基因插入载体pELP-I限制性内切酶BsrGI、HindIII酶切位点之间，转化感受态宿主细胞，诱导表达后，利用弹性蛋白样多肽（ELP）生物学特性及内含肽（Intein）能自我切割特点，从而分离、纯化出表达的外源蛋白。利用该系统制备的重组犬α干扰素与其他表达系统相比，具有不带任何蛋白标签、纯化成本低、操作简便的特点，适用于重组干扰素的批量生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 中华 田园 干扰素 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种重组中华田园犬α干扰素的制备方法，是将PCR扩增出的无信号肽中华田园犬α干扰素基因插入载体pELP‑I‑GFP 限制性内切酶BsrG I、HindIII酶切位点之间，构建得到原核表达载体pELP‑I‑CaIFN‑α；再用pELP‑I‑CaIFN‑α转化感受态宿主细胞，经温度诱导表达、纯化后，用Triton114去除其中的内毒素得到重组中华田园犬α干扰素。
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