[发明专利]一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法

摘要

本发明涉及生物领域，特别公开了一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法。该食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）制备无菌水和试管斜面；（2）制备母种菌丝悬液；（3）扩接；（4）培养。本发明食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法的有益效果是：所需设备简单，操作方法简易，成本低廉；接种速度快，5mL菌丝悬液可扩接100支母种，用时10～15min；可大幅度缩短食用菌单一型菌丝类母种扩繁时的发菌时间，菌龄短且一致，菌丝活力旺盛，尤其是珍稀食用菌更加明显，为食用菌生产提供良好的基础，能使母种快速扩繁，满足食用菌大规模生产所需的优质、复壮母种。

主权项

一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）制备无菌水和试管斜面：a.在三角瓶中加入水，瓶口用牛皮纸扎口；b.培养基采用加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基，其制备方法为：先将马铃薯洗净去皮，再称取200g切碎，加80g麦麸，加水1000 mL文火煮沸20～30 min后，用四层纱布过滤，再加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g和琼脂20g，继续加热搅拌混匀至琼脂融化，再补足水量至1000mL，在温度不低于70℃时将培养基分装至试管长度的1/4～1/5，试管口加梳棉塞，然后用牛皮纸在试管口棉塞外捆扎；c.将盛有水的三角瓶和盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的试管立即装入高压锅，0.11～0.12MPa高压灭菌30 min，灭菌后5 min内将加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基摆成顶端距试管口30～50mm的斜面，摆成斜面培养基长度130mm，将无菌水和加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基冷却后备用；（2）制备母种菌丝悬液：选用组织分离培养的优质健壮的母种，在无菌条件下，用无菌移液管或注射器在被扩母种试管内注入无菌水，用接种针拌碎生长有被扩母种的培养基，制成母种菌丝悬液；（3）扩接：在无菌条件下，用无菌移液管或注射器抽取母种菌丝悬液5mL，在每一支步骤（1）制备的盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的扩接试管内注入0.05mL母种菌丝悬液摆平；（4）培养：将扩接试管放入恒温培养箱内恒温培养，食用菌单一型菌丝类母种6～8天菌丝即可长满130mm的试管斜面培养基。