[发明专利]一种蓝鳍、大目和黄鳍金枪鱼生鱼片的PCR鉴定方法无效
| 申请号： | 201110422249.8 | 申请日： | 2011-12-16 |
| 公开（公告）号： | CN102559874A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 王联珠;姚琳;江艳华;朱文嘉;翟毓秀;宋春丽;李烨;李晓庆 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京中伟智信专利商标代理事务所 11325 | 代理人： | 张岱 |
| 地址： | 266071 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 一种蓝鳍、大目和黄鳍金枪鱼生鱼片的PCR鉴定方法，属于食品检测技术领域，包括以下步骤：金枪鱼生鱼片DNA的提取，以提取DNA为模板，以F1/F2为引物，PCR扩增COI基因片段，电泳检测扩增片段，纯化后将PCR产物测序；PCR测序结果通过NCBI网站在线提供的BLSAT软件，确定生鱼片来源鱼的属；确定属后，再通过分析COI扩增片段的种特异性核酸位点确定金枪鱼生鱼片来源鱼的品种。本发明从分子水平上对金枪鱼生鱼片的来源鱼品种进行鉴定，能够准确区分金枪鱼生鱼片的来源，对规范金枪鱼生鱼片市场具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 金枪鱼 生鱼片 pcr 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种蓝鳍、大目和黄鳍金枪鱼生鱼片的PCR鉴定方法，其特征在于包括以下步骤：1)提取金枪鱼生鱼片DNA；2)以提取的DNA为模板，以F1/F2为引物，PCR扩增COI基因片段，其中F1：5‑CACAAAGACATTGGCACCCT‑3；F2：5‑CCTCCTGCAGGGTCAAAGAA‑3；3)琼脂糖凝胶电泳检测扩增片段，将650bp的目的条带切下纯化，将纯化后的PCR产物测序；4)PCR产物测序结果通过NCBI网站在线提供的BLSAT软件，确定金枪鱼生鱼片来源鱼的属(Genus)；5)确定属(Genus)后，再通过分析COI扩增片段的种特异性核酸位点确定金枪鱼生鱼片来源鱼的品种(Species)，即蓝鳍金枪鱼的COI基因扩增片段的第337个碱基为胸腺嘧啶T，第508个碱基为鸟嘌呤G，大目金枪鱼和黄鳍金枪鱼在上述两个位点均为胞嘧啶C；大目金枪鱼COI基因扩增片段的第400个碱基为胞嘧啶C或者鸟嘌呤G，蓝鳍金枪鱼和黄鳍金枪鱼鱼在该位点均为胸腺嘧啶T。
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