[发明专利]一种鸭病毒性肝炎自杀性DNA疫苗及其构建方法和应用

摘要

本发明涉及动物病毒学与动物传染病学的技术领域，特别涉及一种鸭病毒性肝炎自杀性DNA疫苗及其构建方法和应用。本发明的鸭病毒性肝炎自杀性DNA疫苗，该疫苗由DHV-VP1基因和甲病毒复制子载体pSCA1组成，该DNA疫苗的构建包括如下步骤：DHV病毒总RNA的提取及纯化，设计特异性引物，通过RT-PCR扩增，克隆得到DHV-VP1的全长cDNA基因序列，最后将纯化后的VP1全长cDNA片段重组到甲病毒复制子载体pSCA1真核表达质粒中。与现有技术相比，本发明的疫苗所需的免疫剂量小，安全，高效；可随细胞凋亡而被机体清除，从而可避免DNA质粒可能整合到宿主细胞染色体或可能造成免疫耐受等隐患，且更长效，稳定，操作便捷。

主权项

一种鸭病毒性肝炎自杀性DNA疫苗，其特征在于，该疫苗由DHV‑VP1基因和甲病毒复制子载体pSCA1组成，所述DHV‑VP1基因是DHV病毒的致病决定基因，其为DHV病毒基因中第2106至2819的核苷酸，具有如下所示的核苷酸序列：ggtgattcca accagttggg ggatgatgag ccagtttgct ttctaaattt tgagacagct   60aatgtcccaa tacaaggtga atctcacact cttgttaaac acctgtttgg gaggcaatgg  120ttagttaaga ctgtgcaaca cgcttcaact gtgcaagagt tggacctcca agttccagac  180agaggacatg cctctctcat tcagttcttt gtctattttt ctggagagat cattctcact  240attgttaaca atggcactac accagcaatg gtagcacact cctattctat ggatgacctc  300agttcagagt atgctgttac agcaatggga ggtgtgatga ttcctgctaa cagtgccaaa  360aatatttctg taccattcta ctctgtaaca ccactcaggc caactcgacc aattcctggc  420acatcagagg caacttttgg cagactgttc atgtggactc aatcaggaag tctttcagtt  480tttatgggtc tcaaaaagcc agctctcttc tttccactcc ctgctcccac ctccacaata  540ctaccacaga aatccaaaga tgttattccc acattgaatc agtctgggga tgaagtagat  600tgtcacttct gcgaaatttg ctctaaaatg aagaggaggt ggaagccaag agggtacttc  660agattttgcc ttaggctcaa aacactagca tctgaactca atctggaaat tgaa        714。