[发明专利]一种从美洲大蠊体内分离获取异黄酮类化合物的方法

摘要

一种从美洲大蠊体内分离获取异黄酮类化合物的方法，涉及一种从昆虫体内提取分离异黄酮类化合物的方法，方法中先用二氯甲烷及甲醇溶液对粉碎后的虫体浸泡提取，经过滤、浓缩、冷冻干燥得到粗提物浸膏，然后将粗提物浸膏用洗脱剂氯仿-甲醇混合液和甲醇-水混合液在硅胶柱上进行纯化分离，又经离心分离、过滤等操作最后得到异黄酮类化合物Ⅰ和化合物Ⅱ。本发明首次从昆虫美洲大蠊体内分离得到两种异黄酮类化合物，其中化合物Ⅰ为首次发现于昆虫中的新的具有抗菌活性的异黄酮类化合物，具有重要应用价值。

主权项

1.一种从美洲大蠊体内分离获取异黄酮类化合物的方法，其特征在于：分离出的异黄酮类化合物为两种，它们的化学结构式分别为：化合物Ⅰ化合物Ⅱ化合物Ⅰ的化学式为：C₂₆H₂₈0₆，化学名称被命名为：12-(16-羟基，17，18-二甲基)异戊醇基，13-氧代（19，20-二甲基）-[7,8]骈环氧己烯-11，12基，3-（4’-甲氧基）-苯基-5-羟基异黄酮；化合物Ⅱ的化学式为：C₁₅H₁₀0₅，化学名称为：5,7-二羟基，4’-羟基-异黄酮；分离获取方法的步骤为：（1）、粗提物制备：将美洲大蠊成虫干燥粉碎，粉碎后的美洲大蠊置于二氯甲烷中，室温下，超声波辅助浸泡2~4d后，过滤，得到虫体残渣，再将其置于二氯甲烷中，室温下超声波辅助浸泡2~4d后，再次过滤得到虫体残渣，虫体残渣经干燥处理后，在室温下用浓度为60%~90%的甲醇溶液浸泡2~4d，过程中用超声波辅助提取，然后抽滤，得到滤液，滤渣再按照上述方法用甲醇溶液提取一次，再抽滤，合并两次抽滤所得的滤液，将滤液浓缩，-30℃下冷冻干燥，得粗提物浸膏；（2）柱色谱分离纯化：将得到的粗提物浸膏用200~300目硅胶柱层析，先用体积比为10:1~1:10的不同浓度的氯仿-甲醇混合液进行梯度洗脱，再用体积比为10:1~7:3的不同浓度的甲醇-水混合液进行梯度洗脱，洗脱过程中流出液每20ml接一瓶，用TLC跟踪检测流出液的组分，洗脱结束后，将组分相同的流出液合并，合并后得到6组不同组分的流出液，流出液静置后，其中一组底部有淡黄色物质析出，经离心分离后得淡黄色无定形粉末，即为化合物Ⅰ，其中另一组静置后有白色固体析出，经离心分离后取上清液，蒸除上清液中的溶剂后得到浸膏，将此浸膏进行硅胶柱层析，用体积比为10:1~1:10的不同浓度的氯仿-甲醇混合液进行梯度洗脱，当洗脱至氯仿-甲醇的体积比为7:3时，所得到的流出液静置后有微黄色固体析出，过滤，滤出的固体用甲醇重结晶，得到淡黄色固体粉末，即为化合物Ⅱ。