[发明专利]一种凝血酶原时间测定试剂的制备方法无效
申请号: | 201110446209.7 | 申请日: | 2011-12-28 |
公开(公告)号: | CN102565427A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 王小良 | 申请(专利权)人: | 苏州良辰生物医药科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/86 | 分类号: | G01N33/86 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 汪青 |
地址: | 215600 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种凝血酶原时间测定试剂(PT试剂)的制备方法,包括如下步骤:通过基因工程的方法制备纯度在90%以上的牛或羊组织因子,将磷脂分散于含表面活性剂的磷酸缓冲液中,然后将所述组织因子与所述磷脂相混合,使两者充分结合,最后用C18树脂吸附分离出表面活性剂,冻干后制得本发明PT试剂产品。本发明制备方法工艺稳定,可操作性强,所制得的PT试剂稳定性和灵敏性更好,且杂质少,质量容易保证。 | ||
搜索关键词: | 一种 凝血酶原 时间 测定 试剂 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种凝血酶原时间测定试剂的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)、通过基因工程的方法制备纯度在90%以上的牛或羊组织因子,并将所述组织因子溶于水或磷酸缓冲液中形成组织因子溶液;(2)、将适量磷脂溶于含有表面活性剂的磷酸缓冲液中,搅拌60~120分钟后,获得均匀分散的磷脂溶液;所述磷酸缓冲液的pH值在7.2~7.6之间,表面活性剂的质量含量为1%;(3)、将步骤(1)制备得到的组织因子溶液加入步骤(2)所得的磷脂溶液中,使磷脂与组织因子的质量比在2.5×103~4×103:1之间,然后继续搅拌40~90分钟,得到磷脂/组织因子溶液;(4)、向步骤(3)所得的磷脂/组织因子溶液中加入体积为所述磷脂/组织因子溶液体积的1/10的完全溶胀的烷基键合硅胶,然后每间隔8~12分钟,进行一次摇匀,摇匀多次后,得到浑浊液体;(5)、对步骤(4)所得的浑浊液体进行离心分离,滤除沉淀,取上清液冻干,即得所述的凝血酶原时间测定试剂。
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