[发明专利]一种用乙醇分级沉淀纯化DNA的方法有效
| 申请号： | 201110446534.3 | 申请日： | 2011-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN102559659A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 余志良;赵春田;张正波 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;王兵 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用乙醇分级沉淀纯化DNA的方法：(1)在PCR扩增产物中加入无水乙醇使得到的混合液乙醇体积终浓度为35～45％，在-20℃下沉淀后，离心收集上清液A，丢弃杂质沉淀A；(2)取所述的上清液A中加入无水乙醇使得到的上清液A乙醇混合液中乙醇的体积终浓度为60～75％，在-20℃下再沉淀后，离心，除去上清液B，收集沉淀B；(3)取沉淀B用体积浓度为75％乙醇水溶液洗涤后，离心，除去上清液C，收集沉淀C；(4)50℃烘干沉淀C后，再加入TE溶液溶解，获得纯化后的DNA；本发明纯化方法成本低，操作简单方便，适用性广，所纯化制备的DNA纯度高，环境友好等，具有广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 乙醇 分级 沉淀 纯化 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种用乙醇分级沉淀纯化DNA的方法，其特征在于所述方法为：(1)在PCR扩增产物中加入无水乙醇使得到的混合液乙醇体积终浓度为35～45％，在‑20℃下沉淀后，离心收集上清液A，丢弃杂质沉淀A；所述PCR扩增产物中还包含0～0.3mM焦磷酸、0～20.0nM寡核苷酸引物链、0～26.7μM核苷酸和0～0.1U Taq聚合酶；(2)取所述的上清液A加入无水乙醇使得到的上清液A乙醇混合液中乙醇的体积终浓度为60～75％，在‑20℃下再沉淀后，离心，除去上清液B，收集沉淀B；(3)取沉淀B用体积浓度为75％乙醇水溶液洗涤后，离心，除去上清液C，收集沉淀C；(4)50℃烘干沉淀C后，再加入TE溶液溶解，获得纯化后的DNA。
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