[发明专利]一种表面展示纤维素酶的重组酿酒酵母及构建方法和应用无效
| 申请号： | 201110446673.6 | 申请日： | 2011-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN102517224A | 公开（公告）日： | 2012-06-27 |
| 发明（设计）人： | 阮晖;张延;杨璐;杜珊珊;徐娟;周陈伟;纪晓燚;吴渊;何国庆 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N9/42;C12R1/865 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种表面展示纤维素酶的重组酿酒酵母及构建方法和应用。该重组酿酒酵母的构建方法为：将纤维素酶基因插入酿酒酵母表达载体pGMAK中GAL1启动子下游MFα1信号肽与酿酒酵母的细胞壁α凝集素基因之间，构建获得重组质粒；采用同源重组技术将酿酒酵母的GAL1基因替换为GAL4基因，将所述重组质粒转入该细胞，获得重组酿酒酵母。本发明通过同源重组技术获得了具有双重GAL4基因的重组酿酒酵母，可有效提高GAL1启动子表达效率；同时，细胞壁α凝集素能将纤维素酶高密度展示表达在酿酒酵母细胞壁外表面。利用该重组酿酒酵母表面展示纤维素酶，表达效率较高，表达量较大，能获得较高酶活的纤维素酶，且酵母发酵培养后可直接作为纤维素酶制剂使用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表面 展示 纤维素酶 重组 酿酒 酵母 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种表面展示纤维素酶的重组酿酒酵母，为含有重组质粒的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，其特征在于，所述酿酒酵母的GAL1基因被GAL4基因替换；所述的重组质粒由酿酒酵母表达载体pGMAK和插入酿酒酵母表达载体pGMAK中GAL1启动子下游MFα1信号肽与酿酒酵母的细胞壁α凝集素基因之间的纤维素酶基因组成。
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