[发明专利]一种定量检测氮末端脑钠肽的荧光免疫层析方法及其试剂盒

摘要

本发明公开了一种定量检测急性心肌梗塞标志物氮末端脑钠肽NT-proBNP的荧光免疫层析方法及其试剂盒。本发明的定量检测氮末端脑钠肽的荧光免疫层析方法利用量子点优良的荧光特性，结合双色标记技术和免疫层析技术，在优化试纸条各组成部件的基础上，实现的荧光定量检测。与常规胶体金免疫层析方法相比，本发明具有标记稳定性好、非特异性低、灵敏度高、线性范围宽以及定量准确的优势。本发明试剂盒对NT-proBNP进行定量检测，适用于全血、血清和血浆样本的检测，可为心脑血管疾病诊断提供参考，可广泛用于基层医院和诊所。

主权项

一种定量检测氮末端脑钠肽NT‑proBNP的荧光免疫层析方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)用化学交联或生物分子间特异性作用将氮末端脑钠肽NT‑proBNP的特异性抗体连接到量子点表面，得到抗体修饰的量子点，所述抗体修饰的量子点的发射波长范围为550～1300nm；步骤2)将步骤1)得到的抗体修饰的量子点固定在标记垫上，且标记垫上同时固定有质控分子修饰的量子点，所述质控分子修饰的量子点的发射波长与步骤1)得到的抗体修饰的量子点的发射波长不同，且波长范围为550～1300nm，在层析膜上分别设有定量带和质控带，其中质控带固定有能与所述质控分子特异性结合的生物分子，定量带固定有对应NT‑proBNP的与步骤1)所述特异性抗体不同抗原决定簇的特异性抗体；步骤3)以样品垫、标记垫、层析膜、吸水垫和底板构建成荧光免疫层析试纸条，其中所述层析膜为弱荧光层析膜，底板具低荧光特性；步骤4)试纸条免疫层析后，检测定量带和质控带荧光信号强度，并以质控带荧光信号强度校正定量带荧光信号强度，进而实现NT‑proBNP的定量检测。