[发明专利]一种定量检测人心型脂肪酸结合蛋白的荧光免疫层析方法及其试剂盒

摘要

本发明公开了一种定量检测人心型脂肪酸结合蛋白(hFABP)的荧光免疫层析方法及其试剂盒。本发明的定量检测hFABP荧光免疫层析方法是利用量子点的优良荧光特性，结合双色标记技术及免疫层析技术，在优化试纸条各组成部件基础上，实现的荧光定量检测。与常规胶体金免疫层析方法相比，本发明具有标记稳定性好、非特异性低、灵敏度高、线性范围宽以及定量准确的优势。本发明试剂盒对hFABP进行的定量检测，可同时检测全血、血清及血浆样品，从而为急性心肌梗塞的早期筛查和预后评估提供了一种简便、准确、特异、价廉的检测工具，适用于各级医院，特别有助于在基层医院及诊所的广泛推广。

主权项

一种定量检测人心型脂肪酸结合蛋白的荧光免疫层析方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)用化学交联或生物分子间特异性作用将人心型脂肪酸结合蛋白的特异性抗体连接到量子点表面，得到抗体修饰的量子点，所述抗体修饰的量子点的发射波长范围为550～1300nm；步骤2)将步骤1)得到的抗体修饰的量子点固定在标记垫上，且标记垫上同时固定有质控分子修饰的量子点，所述质控分子修饰的量子点的发射波长与步骤1)得到的抗体修饰的量子点的发射波长不同，且波长范围为550～1300nm，在层析膜上分别设有定量带和质控带，其中质控带固定有能与所述质控分子特异性结合的生物分子，定量带固定有对应心型脂肪酸结合蛋白的与步骤1)所述特异性抗体不同抗原决定簇的特异性抗体；步骤3)以样品垫、标记垫、层析膜、吸水垫和底板构建成荧光免疫层析试纸条，其中所述层析膜为弱荧光层析膜，底板具低荧光特性；步骤4)试纸条免疫层析后，检测定量带和质控带的荧光信号强度，并以质控带荧光信号强度校正定量带的荧光信号强度，进而实现人心型脂肪酸结合蛋白的定量检测。1.根据权利要求1所述的荧光免疫层析方法，其特征在于，步骤1)所述抗体修饰的量子点的发射波长为900nm，步骤2)所述质控分子修饰的量子点的发射波长为600nm。