[发明专利]一种生产非人哺乳类转基因动物的方法无效
| 申请号： | 201110457094.1 | 申请日： | 2011-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN102559756A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 李青旺;韩增胜;赵红卫;胡建宏 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/68;G01N33/53;A61D19/04;A01K67/027 |
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| 地址： | 712100 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明一种生产非人哺乳类转基因动物的方法，包括(1)构建含有目标基因GFP的表达质粒载体。(2)含有目标基因GFP的阳离子脂质体复合物的制备。(3)含有目标基因GFP的阳离子脂质体复合物直接转染非人哺乳动物早期胚胎或受精卵中，得到含有目标基因GFP的转基因胚胎。(4)将含有目标基因的转基因胚胎移植入受体动物体内。本发明的技术是以阳离子脂质体与含有目标基因GFP的表达质粒载体共孵育，再导入动物早期胚胎或受精卵，该方法简便、高效，而且操作过程中质粒等中间产物稳定，能获得性状稳定的转基因动物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生产 非人 哺乳类 转基因 动物 方法 | ||
【主权项】：
一种生产非人哺乳类转基因动物的方法，包括构建含有目标基因的表达质粒载体和将含有目标基因的转基因胚胎移植入受体目的动物体内的步骤，所述目标基因为各种非编码蛋白的功能基因和蛋白质编码基因，其特征在于，所述含有目标基因的表达质粒载体的上游包含真核启动子及其基因表达调控元件序列；在上述步骤中间还含有目标基因的转基因胚胎的培育步骤，所述培育步骤包括以下步骤：(1)将构建所得的含有目标基因的表达质粒载体与阳离子脂质体混合，室温下，混匀孵育，得到含有目标基因的阳离子脂质体复合物；(2)将步骤(1)所得的含有目标基因的阳离子脂质体复合物直接转染非人哺乳动物早期胚胎或受精卵中，37℃，5％CO2条件下共培养4‑6小时，筛选报告基因标记，采用分子生物学技术进行检测，得到含有目标基因的转基因胚胎。
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