[发明专利]一种芸薹属植物对根肿病抗性的鉴定方法

摘要

本发明公开了一种芸薹属植物对根肿病抗性的鉴定方法，属于芸薹属作物抗病性鉴定技术领域。该方法用酸性水浸泡后的珍珠岩与打碎的芸薹根肿菌菌根按1升：10～15克比例混合成培养基质，培养基质填充在冷冻盒格内，待鉴定品种的种子和感根肿病的感病品种种子播于冷冻盒的格内，每一格播1粒种子，冷冻盒置于瓷盘内，用1/2MS培养基作和打碎的芸薹根肿菌菌根制成pH为5.5，病菌孢子含量为1×108个/毫升以上的接种菌液；接种菌液注入瓷盘内，置入人工气候箱内培养，根据调查的病情指数鉴定待鉴定品种对根肿病的抗性。该方法可规模化鉴定根肿病的抗性，节省大量土地，保证鉴定条件一致，省时省工，鉴定结果准确可靠，操作简便。

主权项

1.一种芸薹属植物对根肿病抗性的鉴定方法，其特征在于步骤如下：（1）培养基质的制备用珍珠岩和打碎的芸薹根肿菌菌根混合而成的混合物作为培养基质，珍珠岩在使用前用pH为5.0～5.5的酸性水浸泡72～96小时，珍珠岩与打碎的芸薹根肿菌菌根混合的比例为1升：10～15克； （2）培养基质的填充用冷冻盒作为培养器皿，将冷冻盒的每一格底部打一个孔，将培养基质填充在冷冻盒的格内，培养基质的高度低于格子高度2mm～3mm；（3）播种将待鉴定品种的种子播于冷冻盒的格内，每一格播1粒种子，播种后再覆盖一层培养基质，使培养基质的高度与冷冻盒的格子高度一致，盖上盒盖，将冷冻盒置于瓷盘内或不锈钢盘内；（4）接种菌液的制备用1/2MS培养基作为培养液，将打碎的芸薹根肿菌菌根和所述的培养液混合，制成病菌孢子含量为1×10⁸个/毫升以上的溶液，用1mol/L的盐酸溶液调节溶液的pH为5.5即制成接种菌液；（5）将接种菌液注入所述的瓷盘内或不锈钢盘内，使接种液的高度为0.5~1.0cm；（6）每一鉴定批次用感根肿病的感病品种作为对照；（7）将注入了接种菌液的瓷盘或不锈钢盘及其盘内的冷冻盒一起置入人工气候箱内，30℃暗培养3天，保持空气湿度在48～52%，3天后，打开盒盖和气候箱光源，转入光照生长，光照时间12 h/d，光照强度5300～5500lx，调节空气湿度在75%～80%，调节人工气候箱的温度为24℃～26℃；（8）病情指数的调查统计  对照材料在培养基质以上的叶片萎蔫和根部肿大时，按单株病症分级标准进行调查统计，计算病情指数，根据调查的病情指数，按群体抗性分级标准鉴定出待鉴定品种对根肿病的抗性；所述的单株病症分级标准是：病级  病症0 级：根不膨大，1 级：根膨大，根直径＜0.3厘米，2 级：根膨大，0.3厘米≤根直径≤0.6厘米，3 级：根膨大，根直径＞0.6厘米；病情指数的计算公式是：所述的群体抗性分级标准是：群体抗性分级    病情指数免疫：           0.00—0.10；高抗：           0.11—5.55；抗病：           5.56—11.11；耐病：           11.12—33.33；感病：           33.34—55.55；高感：           55.56—100.00。