[发明专利]分离和纯化核酸的方法有效
申请号: | 201180014324.5 | 申请日: | 2011-04-08 |
公开(公告)号: | CN102812118A | 公开(公告)日: | 2012-12-05 |
发明(设计)人: | R·法比斯;M·穆勒;J·赫克伦布罗奇;M·谢雷尔 | 申请(专利权)人: | 恰根有限公司 |
主分类号: | C12N1/06 | 分类号: | C12N1/06;C12N15/10 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 沈端 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | 本发明涉及从生物样品分离和纯化核酸(优选包含基因组DNA)的方法,包括用含阴离子表面活性剂离子源的裂解缓冲液裂解样品的步骤,可选分解存在于裂解物中的RNA,从裂解物中沉淀所述表面活性剂离子,并通过尺寸排阻色谱法将所述核酸从沉淀物中并与其它污染物分离。本发明还涉及裂解缓冲液,裂解细胞的方法和用于分离和纯化核酸的试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 分离 纯化 核酸 方法 | ||
【主权项】:
一种从含核酸与污染物的生物样品分离和纯化核酸优选含DNA的方法,所述方法包括以下步骤:1.混合样品和裂解缓冲液,所述裂解缓冲液含有阴离子表面活性剂源但基本不含螯合剂或络合剂,2.孵育步骤1所得混合物以获得含有DNA、RNA和蛋白质的裂解物,3.可选分解裂解物中存在的RNA,4.从所述裂解物中去除表面活性剂离子,优选通过向所述裂解物添加含有碱金属单价离子和/或碱土金属二价离子,所述离子选自包含Rb+,Cs+,Ca2+,Sr2+,Ba2+或其混合物的组,优选选自Rb+,Cs+,Ca2+,Sr2+,Ba2+或其混合物组成的组,5.将核酸与沉淀物和裂解物中的其它污染物分离,至少后者优选通过尺寸排阻色谱来获得经纯化的含核酸洗脱物。
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