[发明专利]内源启动子在表达异源蛋白中的用途有效
| 申请号： | 201180029129.X | 申请日： | 2011-04-13 |
| 公开（公告）号： | CN102959078A | 公开（公告）日： | 2013-03-06 |
| 发明（设计）人： | G.戴维斯;D.马尔科夫;N.津泽 | 申请（专利权）人： | 西格马－奥尔德里奇有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N15/00 | 分类号： | C12N15/00 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 孔青;梁谋 |
| 地址： | 美国密*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供了利用内源的转录控制系统调节异源蛋白的表达的方法。具体而言，靶定基因组编辑用于将编码异源蛋白的序列符合读框地与内源的编码序列整合，使得所述异源序列和内源序列的表达通过内源控制系统来调节。 | ||
| 搜索关键词： | 内源 启动子 表达 蛋白 中的 用途 | ||
【主权项】：
一种将编码至少一种异源蛋白的序列整合至细胞的染色体中使得所述至少一种异源蛋白的表达通过内源调节系统来调节的方法，所述方法包括：a) 将以下物质引入细胞中：(i)至少一种靶向内切核酸酶或编码靶向内切核酸酶的核酸，所述靶向内切核酸酶能结合靶序列并切割编码内源蛋白的靶定染色体序列中的切割位点；和(ii)包含编码所述至少一种异源蛋白的序列的至少一种供体多核苷酸，所述序列与编码2A肽的序列连接以形成异源蛋白编码序列，所述异源蛋白编码序列被与切割位点任一侧有基本序列同一性的上游序列和下游序列侧接；和(b) 将所述细胞保持在这样的条件下，所述条件使得通过同源性定向的修复过程修复通过靶向内切核酸酶引入靶定染色体序列中的双链断裂，使得所述供体多核苷酸中的所述异源蛋白编码序列符合读框地整合至靶定染色体序列中，从而所述至少一种异源蛋白的表达通过调节内源蛋白表达的内源调节系统来调节。
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