[发明专利]一种微波驱动的杯状病毒RNA聚合酶的RNA聚合反应

摘要

本发明涉及一种以单链多核苷酸为模板合成互补RNA链的方法，该方法包括以下步骤：采用有效量的微波能量对含有所述模板以及一种杯状病毒科家族病毒的RNA聚合酶的混合物在RNA聚合反应条件下并在引物存在或缺席的条件下进行辐照，所述引物与模板杂交。本发明的另一主题涉及一种将一个或多个核苷酸转移至单链多核苷酸模板的3’端上的方法，该方法包括以下步骤：采用有效量的微波能量对含有杯状病毒科家族病毒的RNA聚合酶的混合物在rATP或rGTP或rUTP或rCTP或其修饰的或标记的类似物存在的条件下进行辐照。

主权项

一种以单链多核苷酸为模板合成互补RNA链的方法，所述方法包括以下步骤：采用有效量的微波能量对含有所述模板以及一种杯状病毒科家族病毒的RNA聚合酶的混合物在RNA聚合反应条件下并在引物存在或缺席的条件下进行辐照，所述引物与所述模板杂交，其附加条件为，如果所述模板含有脱氧核糖核苷酸，该辐照在修饰的GTP，优选2’‑氟代‑GTP或α‑硫代‑GTP存在的条件下进行，以及，如果所述模板含有的脱氧核糖核苷酸在其3’端具有非脱氧‑C核苷酸时，该辐照步骤在引物存在的条件下进行，所述引物与所述模板杂交，另一附加条件为，如果所述模板分别是聚腺苷酸，聚鸟苷酸或聚尿苷酸RNA或分别是polyA,polyG或polyU RNA，该辐照步骤在引物存在的条件下进行，所述引物与所述模板杂交，以及如果所述模板是聚胞苷酸，所述辐照步骤在引物缺席的条件下进行，所述混合物含有的GTP分别相对ATP,CTP和UTP过量。