[发明专利]用于多种参数的对照核酸在审
申请号: | 201180046506.0 | 申请日: | 2011-07-27 |
公开(公告)号: | CN103154269A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | M.埃克霍夫;N.希齐格;D.齐默尔曼;S.G.威尔;E.H.菲斯;J.格劳比茨 | 申请(专利权)人: | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/70 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张红春 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | 本发明关注出于定性和/或定量目的使用内部对照核酸来扩增可能存在于至少一份流体样品中的至少第一和第二靶核酸。 | ||
搜索关键词: | 用于 多种 参数 对照 核酸 | ||
【主权项】:
一种用于分离及同时扩增可能存在于一份或多份流体样品中的至少第一和第二靶核酸的方法,所述方法包括下列自动化步骤:a.向每份所述流体样品添加内部对照核酸,b.在一个或多个容器中将固体支持材料和所述一份或多份流体样品于一定条件下组合在一起达一段时间,该条件和时间段足以允许包含所述靶核酸和所述内部对照核酸的核酸在所述固体支持材料上固定化,c.在分离站中将所述固体支持材料与存在于所述流体样品中的其它材料分离,d.在所述分离站中纯化所述核酸,并将所述固体支持材料用清洗缓冲液清洗一次或多次,e.在至少两个反应容器中使纯化的靶核酸和纯化的内部对照核酸与一种或多种扩增试剂接触,所述扩增试剂包含针对每一种所述靶核酸和针对所述内部对照核酸的至少一组独特引物,其中至少第一反应容器至少包含所述第一靶核酸,且至少第二反应容器至少包含所述第二靶核酸,且其中所述第二靶核酸不存在于第一反应容器中,f.在所述反应容器中将所述纯化的靶核酸和所述纯化的内部对照核酸与所述一种或多种扩增试剂在一定条件下一起温育一段时间,所述条件和时间段足以发生指示所述靶核酸存在或缺乏的扩增反应,g.检测并测量由所述靶核酸的扩增产物生成并与所述靶核酸的浓度成比例的信号,以及检测并测量由所述内部对照核酸生成的信号,其中步骤d.至g.中用于扩增和检测的条件对于所述至少第一和第二纯化的靶核酸和所述内部对照核酸是相同的,且其中所述内部对照核酸的序列对于所述至少第一和第二纯化的靶核酸是相同的。
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