[发明专利]表达和纯化植物中重组蛋白的低成本方法在审
申请号: | 201180068005.2 | 申请日: | 2011-12-21 |
公开(公告)号: | CN103732758A | 公开(公告)日: | 2014-04-16 |
发明(设计)人: | 辛世文;田莉 | 申请(专利权)人: | 香港中文大学 |
主分类号: | C12P21/04 | 分类号: | C12P21/04;C12N5/10;C07K1/14 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 韦东 |
地址: | 中国香港*** | 国省代码: | 中国香港;81 |
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摘要: | 通过弹性蛋白样多肽(ELP)-内含肽融合表达并通过ELP的反相变和内含肽的切割反应对来自基于植物的样品的重组蛋白进行下游纯化。 | ||
搜索关键词: | 表达 纯化 植物 重组 蛋白 低成本 方法 | ||
【主权项】:
一种从植物、植物部分或植物细胞获得所需蛋白质的方法,所述方法包括(a)从产生所需蛋白质的所述植物、植物部分或植物细胞制备蛋白质提取物,其中,所需蛋白质为融合蛋白形式,所述融合蛋白在所需蛋白质的N末端或C末端或所述两个末端包含ELP‑内含肽标签,该标签包含弹性蛋白样多肽(ELP)结构域和内含肽剪接元件(内含肽),其中,所述内含肽在所需蛋白质的N和/或C末端或所述两个末端与所述ELP结构域之间;(b)可任选地从所述提取物去除不溶性物质;(c)使所述融合蛋白聚集并与所述提取物的剩余部分分离;(d)使所述融合蛋白重溶解于水性溶液;可任选地重复步骤(c)和(d);(e)实行所述融合蛋白的切割;以及(f)分离所需蛋白质和所述一个/多个标签。
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