[发明专利]产生单克隆植物细胞系的方法有效
| 申请号： | 201180071503.2 | 申请日： | 2011-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN103596423B | 公开（公告）日： | 2017-05-24 |
| 发明（设计）人： | 珍娜·基尔霍夫;史蒂芬·雪勒伯格;安德烈斯·席尔迈尔;海尔格·辛克尔;莱纳·费希尔 | 申请（专利权）人： | 弗劳恩霍夫应用研究促进协会 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04;A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京思益华伦专利代理事务所(普通合伙)11418 | 代理人： | 赵飞,郭红丽 |
| 地址： | 德国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明提供一种由植物细胞的异种群体产生单克隆植物细胞系的方法，其包含下列步骤（a）提供植物细胞的异种群体；（b）由该植物细胞的异种群体制备原生质体；（c）通过将原生质体制备物进行流式细胞分选而分离单一原生质体；（d）在饲养细胞材料存在的情况下，通过共培养使分离的单一转化原生质体再生直到形成小集落；（e）将小集落从饲养细胞材料中转移，并培养小集落直到形成单克隆植物细胞系。 | ||
| 搜索关键词： | 产生 单克隆 植物 细胞系 方法 | ||
【主权项】：
一种由植物细胞的异质性群体产生单克隆植物细胞系的方法，其包含下列步骤：(a)提供植物细胞的异质性群体；(b)由该植物细胞的异质性群体制备原生质体并开始再生细胞壁；(c)提供细胞沉积装置，其包括在液体培养基中的饲养细胞材料；(d)通过将原生质体制备物进行FACS而分离单一原生质体；(e)将单一原生质体分选入所述包括饲养细胞材料的细胞沉积装置的液体培养基中；(f)在所述饲养细胞材料存在的情况下，通过共培养对被分离的单一原生质体进行再生，直到形成小集落；以及(g)将小集落从饲养细胞材料中转移，并培养小集落直到形成单克隆植物细胞系，其中，步骤(b)中所制备的原生质体被转化，并且能够：(i)生产荧光标记蛋白质或多肽；(ii)生产期望产物；以及/或者(iii)在选择剂存在的情况下存活。
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