[发明专利]一种培养耐辐射奇球菌生产天然类胡萝卜素的方法

摘要

本发明提供一种耐辐射奇球菌生产天然类胡萝卜素的方法，通过黄浆水的收集、除杂，pH调整，添加培养物、灭菌，菌种的活化、培养种子，发酵培养，菌体破壁，类胡萝卜素萃取，干品制备获得。本发明利用豆腐等豆制品加工制作过程中副产物黄浆水来培养细菌发酵生产天然类胡萝卜素，实现了黄浆水的废物利用，提高了资源利用效率，并降低了豆制品加工企业对环境造成的污染，有利于保护环境，每升黄浆水发酵液可得类胡萝卜素干品229.8mg，优于常规培养发酵提取方法226.2%。本发明先对菌体细胞进行酸热破壁处理，再用乙醇萃取，提取完全、快速，生产工艺流程简单、生产成本低廉，产品无毒性残留、安全性高。

主权项

一种培养耐辐射奇球菌生产天然类胡萝卜素的方法，其特征在于通过以下步骤实现：（1）黄浆水的收集、除杂：将豆腐等豆制品制作过程中的黄浆水收集后，使用多层纱布过滤或进行离心除去其中的杂质、固形物；（2）黄浆水的pH调整：黄浆水自身酸性强，调整黄浆水的pH值为6.8‑7.3；（3）添加培养物、灭菌：将上述（2）中黄浆水添加质量体积百比为0.5‑1%的葡萄糖、0.1%硫酸镁，采用121℃、30分钟高温高压灭菌法灭菌，然后灌装到发酵瓶中作为黄浆水培养基发酵培养；（4）菌种的活化、种子培养：将耐辐射奇球菌R1划线接种于种子培养基TGY固体培养基上，28℃中培养36h，挑取单菌落接种于不含琼脂的液体种子培养基TGY中，30℃、220rpm/min培养至对数生长期；（5）发酵培养：将步骤（4）中的液体种子接入步骤（3）中以黄浆水配制成的培养基进行发酵培养，30‑32℃培养48h，至菌群稳定期；（6）菌体细胞破壁：取出步骤（5）中菌体发酵液离心去上清，收集沉淀菌体，水洗湿菌体除去残留发酵液，加入物料体积比1：3的1.3M盐酸，100℃沸水中加热2min后迅速冷却进行细胞破壁，离心，沉淀菌体细胞水洗2次离心去上清，除去残留盐酸，收集菌体细胞；（7）类胡萝卜素萃取：在步骤（6）的菌体细胞中加入物料质量/体积比为1：5的预冷有机溶剂乙醇，冰浴下5min萃取类胡萝卜素，离心收集上清，提取3次至菌体变白；（8）类胡萝卜素干品制备：将步骤（7）中的类胡萝卜素提取液于真空离心浓缩干燥，干粉即为类胡萝卜素干品。