[发明专利]一种C8:0/C10:0/C12:0/C14:0中链脂肪酸及其乙酯的生产方法无效
申请号: | 201210004794.X | 申请日: | 2012-01-09 |
公开(公告)号: | CN102586350A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 邓利;范丽苹;刘军锋;刘珞;王芳;谭天伟 | 申请(专利权)人: | 北京化工大学 |
主分类号: | C12P7/64 | 分类号: | C12P7/64;C12P7/62;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100029 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种利用工程大肠杆菌合成C8:0/C10:0/C12:0/C14:0中链脂肪酸及其乙酯的生产方法。具体步骤为:将萼距花属植物/月桂树/香樟中具有不同特异性硫酯酶基因chFatB/ucFatB/ccFatB克隆至表达载体pETDuet-1中得到相应重组质粒。将重组质粒转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,表达的硫酯酶特异性水解特定链长的脂酰ACP得到中链脂肪酸;分别将不动杆菌中酰基转移酶基因atfA克隆至表达载体pETDuet-chFatB/pETDuet-ucFatB/pETDuet-ccFatB中得到相应重组质粒。将重组质粒转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,共表达的酰基转移酶利用外源性流加的乙醇与中链脂肪酸在胞内形成的脂酰-CoA发生酰基转移反应合成脂肪酸乙酯,得到利用重组大肠杆菌直接合成中链脂肪酸及其乙酯的工艺路线。 | ||
搜索关键词: | 一种 c8 c10 c12 c14 脂肪酸 及其 生产 方法 | ||
【主权项】:
一种C8:0/C10:0/C12:0/C14:0中链脂肪酸及其乙酯的生产方法,其特征在于,包括:步骤1、分别将萼距花属植物/月桂树/香樟中来自脂酰酰基转运蛋白硫酯酶(FAT)家族中具有不同特异性硫酯酶基因chFatB/ucFatB/ccFatB克隆至原核表达载体,得到重组质粒转至BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达生产中链脂肪酸。步骤2、再将不动杆菌中高度非特异性的双功能蜡酯合成酶/酰基辅酶A二酰甘油酰基转移酶基因atfA分别克隆至已连接硫酯酶基因chFatB/ucFatB/ccFatB的原核表达载体,得到重组质粒转至BL21(DE3)中,经外源性流加乙醇与IPTG诱导表达后生产中链脂肪酸乙醇酯。
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