[发明专利]一种产胆盐水解酶乳酸菌干粉发酵剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种产胆盐水解酶乳酸菌干粉发酵剂的制备方法，适用于功能性酸奶及益生菌制剂等发酵乳制品干粉发酵剂的生产。本发明利用筛选自藏灵菇的干酪乳杆菌KL1、乳酸乳球菌乳亚种KS4和嗜热链球菌Tx三株产胆盐水解酶的菌种，经过活化和扩大培养，利用自动发酵罐进行高密度培养，再经离心浓缩和加入冻干保护剂，预冻和冻干，制备产胆盐水解酶乳酸菌干粉发酵剂。本发明优化高密度培养、预冻和冻干条件，使菌种存活率达到70％以上，且干粉发酵剂活菌数可达1010cfu/g以上。本发明制备的干粉发酵剂发酵牛奶后，所得酸奶口感黏稠细腻幼滑，甜酸度适中，有浓郁的酯香风味。

主权项

一种利用菌株KL1 CGMCCNo.1809为干酪乳杆菌菌（Lactobacillus casei)，菌株KS4 CGMCCNo.1807为乳酸乳球菌乳亚种（Lactococcus lactis subsp.lacti)，菌株Tx CGMCCNo.1810为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)三种产胆盐水解酶乳酸菌制备干粉发酵剂的方法，其特征在于：将菌株KL1、KS4和Tx分别于接种量2％(V/V)，培养温度37℃，培养时间12h的条件下进行活化，得到活化菌种；将活化菌种于接种量3％，培养温度37℃，培养时间12h的条件下分别进行扩大培养，得到扩大培养液；将KL1、KS4和Tx菌株的扩大培养液按3∶1∶2的比例接种于蒙牛纯牛奶中，总接种量为4％，并按纯牛奶体积5％的量加入新鲜胡萝卜原汁作为生长因子，利用5L自动发酵罐进行灭菌和高密度培养，培养温度40℃，培养液pH6.5，搅拌转速50r/min，培养时间6h，得到液体发酵剂；将液体发酵剂于4℃、8000r/mmin离心10min，弃掉上清液，收集得到菌泥；按离心前发酵剂1/10体积的量，取灭菌牛奶作为冻干基质，分装于600mL的冻干瓶中，将离心收集后的菌泥置于冻干基质中，加入2.5％甘油(V/V)、2.5％谷氨酸钠(W/V)和2.5％脱脂奶粉(W/V)的冻干保护剂，混合均匀后，得到浓缩发酵剂；将每个冻干瓶装量为100mL的浓缩发酵剂于‑30℃预冻13h至冻结状态，得到预冻发酵剂；利用美国产6L LABCONCO真空冷冻干燥机将预冻发酵剂于冻干温度‑55℃、真空度0.16mBar条件下，冻干48h至完全干燥状态，得到产胆盐水解酶乳酸菌干粉发酵剂。