[发明专利]一种乙型肝炎病毒基因分型PCR检测试剂盒

摘要

本发明的目的充分利用了Taqman探针技术的优点，针对HBV各基因型设计特异探针，各探针标记不同的荧光染料，在不同波长检测，从而达到分型的目的。本发明试剂盒针对HBV各基因型设计引物和特异探针，检测样品中B、C和D型乙型肝炎病毒，可检测B、C和D型单独感染和混合感染。采用双色探针，FAM波长检测B(或D)型乙型肝炎病毒，HEX波长检测C型乙型肝炎病毒。本试剂盒的优点在于一次实验同时检测B、C和D型乙型肝炎病毒，操作简单，试剂盒中使用dUTP和UNG酶，能够有效消除污染的扩增产物对检测结果的干扰。

主权项

一种乙型肝炎病毒基因分型PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括B/C型PCR反应液和D型PCR反应液；所述B/C型PCR反应液包括：特异性扩增乙型肝炎病毒B和C型基因片段的引物Y1，所述Y1碱基序列如SEQ ID NO：1所示；特异性扩增乙型肝炎病毒B和C型基因片段的的引物Y2，所述Y2碱基序列如SEQ ID NO：2所示；用于检测乙型肝炎病毒B型基因片段的探针Y5，所述Y5碱基序列如SEQ ID NO：5所示；用于检测乙型肝炎病毒B型基因片段的探针Y6，所述Y6碱基序列如SEQ ID NO：6所示；用于检测乙型肝炎病毒C型基因片段的探针Y7，所述Y7碱基序列如SEQ ID NO：7所示；用于检测乙型肝炎病毒C型基因片段的探针Y8，所述Y8碱基序列如SEQ ID NO：8所示；所述D型PCR反应液包括：特异性扩增乙型肝炎病毒D型基因片段的的引物Y3，所述Y3碱基序列如SEQ ID NO：3所示；特异性扩增乙型肝炎病毒D型基因片段的的引物Y4，所述Y4碱基序列如SEQ ID NO：4所示；用于检测乙型肝炎病毒D型基因片段的探针Y9，所述Y9碱基序列如SEQ ID NO：9所示；所述探针5’端用荧光染料标记，3’端用淬灭荧光染料标记。