[发明专利]一种荧光定量RT-PCR检测丙型肝炎病毒的试剂盒

摘要

本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测丙型肝炎病毒的试剂盒，特别是涉及以一步法实时荧光逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术快速、定量检测丙型肝炎病毒感染的试剂盒。本试剂盒具有很高的灵敏度和特异性，通过本发明的试剂盒实现对血清或血浆样本中丙型肝炎病毒核酸RNA进行定量检测，适用于丙型肝炎病毒感染的辅助诊断和丙型肝炎病毒感染者药物治疗的疗效监测。

主权项

一种荧光定量RT‑PCR检测丙型肝炎病毒的试剂盒，试剂盒包括：(1)核酸提取试剂、HCV反应液A、HCV反应液B、HCV反应液C、HCV内标溶液、阴性质控品、HCV强阳性质控品、HCV临界阳性质控品、HCV阳性定量参考品1‑4，和(2)分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒，其中PCR反应体系包括HCV反应液A、HCV反应液B和HCV反应液C，其特征在于HCV反应液A(引物探针混合液)中正向和反向引物分别是：5’‑CATGGCGTTAGTAYGAGTGTCG‑3’(SEQ ID NO：1)5’‑TCCYGGCAATTCCGGTGTAC‑3’(SEQ ID NO：2)；HCV反应液A寡核苷酸探针是5’‑X‑TCCGCAGACCACTATGGCTCTCCCG‑Y‑3’(SEQ ID NO：3)，其中X/Y表示荧光标记基团，包括能够与靶多核苷酸结合并且两末端分别结合的有荧光发生基团和荧光淬灭基团的寡核苷酸探针；HCV反应液A中寡核苷酸探针是5’‑X‑TCCACGGCAACTCTAGTCGCCCTGC‑Y‑3’(SEQ ID NO：4)，其中X/Y表示荧光标记基团，包括能够与内标多核苷酸结合并且两末端分别结合的有荧光发生基团和荧光淬灭基团的寡核苷酸探针。