[发明专利]从表达腺病毒E1A蛋白的细胞中获得唾液酸化增加的重组蛋白质的方法及由此获得的蛋白质有效
| 申请号： | 201210019804.7 | 申请日： | 2005-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN102653772A | 公开（公告）日： | 2012-09-05 |
| 发明（设计）人： | D·J·E·奥普斯泰尔滕 | 申请（专利权）人： | 克鲁塞尔荷兰公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85 |
| 代理公司： | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人： | 王健 |
| 地址： | 荷兰*** | 国省代码： | 荷兰;NL |
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| 摘要： | 本发明提供了包含一或多种同种型红细胞生成素(EPO)的组合物，所述红细胞生成素包含与其连接的聚糖，特征在于所述聚糖包含LewisX结构及每个EPO分子平均至少6个唾液酸部分。本发明进一步提供了获得包含一或多种同种型红细胞生成素(EPO)的组合物的方法，所述红细胞生成素包含与其连接的聚糖，其中所述聚糖包含平均每个EPO分子至少6个唾液酸及0-2个Lewis x结构，所述方法包括：a)提供含有可表达形式的编码腺病毒E1A蛋白的核酸序列及进一步含有可表达形式的编码EPO的核酸的真核细胞，其中所述细胞进一步含有在异源启动子控制下的编码唾液酸转移酶、优选α-2，6-唾液酸转移酶或α-2，3-唾液酸转移酶的核酸序列；b)在无血清培养基中培养所述细胞，使得EPO在所述细胞中表达；c)从所述细胞和/或培养基中收获表达的EPO；及d)纯化并分级分离EPO以获得每个EPO分子N联聚糖的平均唾液酸含量增加的级分，获得包含一或多种同种型EPO的组合物，所述EPO包含与其连接的聚糖，其中所述聚糖包含每个EPO分子平均至少6个唾液酸及0-2个Lewis x结构。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 病毒 e1a 蛋白 细胞 获得 唾液 酸化 增加 重组 蛋白质 方法 由此 | ||
【主权项】：
一种降低在细胞中重组表达的蛋白质上LacdiNAc结构的平均含量的方法，所述方法包括在所述细胞中过表达α‑2，3‑唾液酸转移酶。
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