[发明专利]利用热激和四环素调控的ntCre/LoxP删除系统、重组表达载体及其制备方法和应用有效
申请号: | 201210032918.5 | 申请日: | 2012-02-14 |
公开(公告)号: | CN102533749A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 张兴国;苏承刚;杜小兵;朱利泉;眭顺照;张香琴 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/63;C12N15/66;A01H5/00 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人: | 赵荣之 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明公开了利用热激和四环素双重调控的ntCre/LoxP删除系统,所述ntCre/LoxP删除系统包括ntCre重组酶特异识别的2个LoxP位点和位于2个LoxP位点之间的靶基因部分,所述2个LoxP位点分别为位于靶基因3’端的第一LoxP位点和位于靶基因5’端的第二LoxP位点;还包括HSF70m启动子调控的Rhsf基因表达盒和Om35S启动子调控的ntCre重组酶基因表达盒部分,所述Om35S启动子由Rhsf基因调控;该删除系统受热激和四环素双重调控,能够在无四环素环境下通过热激删除2个LoxP位点之间的靶基因;本发明还公开了含ntCre/LoxP删除系统的重组表达载体,可以应用于植物转基因中删除靶基因,具有删除周期短,操作简单等优点。 | ||
搜索关键词: | 利用 四环素 调控 ntcre loxp 删除 系统 重组 表达 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
利用热激和四环素双重调控的ntCre/LoxP删除系统,其特征在于:所述ntCre/LoxP删除系统包括ntCre重组酶特异识别的2个LoxP位点和位于2个LoxP位点之间的靶基因部分,所述2个LoxP位点分别为位于靶基因3’端的第一LoxP位点和位于靶基因5’端的第二LoxP位点;还包括HSF70m启动子调控的Rhsf基因表达盒和Om35S启动子调控的ntCre重组酶基因表达盒部分,所述Om35S启动子由Rhsf基因调控,所述HSF70m启动子核酸序列如SEQID NO.1所示,所述Rhsf基因核酸序列如SEQ ID NO.24所示,所述Om35S启动子核酸序列如SEQ ID NO.8所示,所述LoxP位点核酸序列如SEQ ID NO.25所示,所述ntCre重组酶基因核酸序列如SEQ ID NO.26所示。
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