[发明专利]一种高效发酵生产谷氨酰胺转胺酶酶原的方法无效
| 申请号： | 201210035336.2 | 申请日： | 2012-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN102559628A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;马建龙;刘松;陈康康;张娟;张东旭;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人： | 王秀丽 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种添加IPTG、低温策略诱导提高重组Escherichia Coli(大肠杆菌)BL21(DE3)发酵生产pro-TGase(谷氨酰胺转胺酶酶原)的方法。本发明采用分泌性表达载体pET22b重组Escherichia Coli BL21(DE3)为发酵菌株，初始生长阶段控制温度为37℃，当菌体生长至一定菌体浓度时进行降温诱导，添加终浓度为0.4mM的IPTG，降温至20℃，诱导pro-TGase的表达。通过在发酵过程中降低诱导阶段温度，最终实现了提高pro-TGase产量的目标。本发明的优点是能有效地提高pro-TGase的产量及生产强度，并减少发酵液中杂蛋白的含量，提高了下游提取时的效率，增加了产品纯度，并且减少了能耗，有利于工业化大规模生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 发酵 生产 谷氨酰胺 转胺酶酶原 方法 | ||
【主权项】：
一种高效发酵生产谷氨酰胺转胺酶酶原的方法，其特征在于：以含有pET22b(+)‑proTGase重组质粒的Escherichia Coli BL21(DE3)为生产菌株，活化后制备种子液，接种入3L改良TB培养基，采用全自动发酵罐发酵，控制搅拌转速为400rpm，培养温度37℃，通气量为1vvm；当菌体浓度达到OD600＝8，时降温至20℃同时并添加终浓度为0.4mM的IPTG进行诱导表达产谷氨酰胺转胺酶酶原。
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