[发明专利]实时监测蛋白水解酶活性的指示剂的制备方法及应用方法无效
| 申请号： | 201210042854.7 | 申请日： | 2012-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN102558310A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 李兵辉;张矫 | 申请（专利权）人： | 李兵辉 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00;C12N15/11;C12Q1/37;G01N21/64 |
| 代理公司： | 淮安市科翔专利商标事务所 32110 | 代理人： | 韩晓斌 |
| 地址： | 223005 江苏省淮*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了实时监测蛋白水解酶活性的指示剂的制备方法及应用方法，是通过对荧光蛋白结构的改造，插入蛋白水解酶的作用位点，观察荧光蛋白荧光的有无及强弱的变化，来实现蛋白水解酶活性的监测；具体如下：对荧光蛋白进行循环置换，用蛋白水解酶识别序列将N端和C端连接改变它们的空间结构，同时产生新的N端和C端，经循环置换后的荧光蛋白即为蛋白水解酶活性指示剂（PAI），在经相应的蛋白水解酶作用后，PAI变成由荧光蛋白的N端和C端两部分肽段组成，这两部分经荧光互补产生荧光。本发明以指示剂为工具在体内实时监测蛋白水解酶在生理及病理过程中的变化，在体外监测样品中蛋白水解酶的活性，灵敏、直观、便捷、省时。 | ||
| 搜索关键词： | 实时 监测 蛋白 水解 活性 指示剂 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
实时监测蛋白水解酶的指示剂的制备方法，用于实时监测蛋白水解酶活性的工具为由荧光蛋白改造而成的蛋白水解酶活性指示剂（PAI），其特征在于该指示剂的制备方法是：对荧光蛋白进行循环置换，用蛋白水解酶识别序列将N端和C端连接改变它们的空间结构，同时产生新的N端和C端，经循环置换后的荧光蛋白即为蛋白水解酶活性指示剂（PAI），PAI没有荧光，在经相应的蛋白水解酶作用后，PAI变成由荧光蛋白的N端和C端两部分肽段组成，这两部分经荧光互补产生荧光，PAI能由基因直接编码。
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