[发明专利]一株重组的枯草芽孢杆菌及由其生产转谷氨酰胺酶的方法有效
| 申请号： | 201210052578.2 | 申请日： | 2012-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN102586167A | 公开（公告）日： | 2012-07-18 |
| 发明（设计）人： | 潘力;王坤;杨慧林;钟景儒 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学;广州市澳键丰泽生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N9/10;C12N15/63;C12R1/125 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 裘晖 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一株重组的枯草芽孢杆菌及由其生产转谷氨酰胺酶的方法，该重组菌株由以下步骤构建得到：(1)通过融合PCR将P43启动子+信号肽基因与subtilisin-like protease基因连接，再将融合PCR扩增产物转化入枯草芽孢杆菌WB800，得到枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800S；(2)PCR扩增茂原链霉菌转谷氨酰胺酶酶原基因，然后将扩增产物转化入枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800S中得到枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800S/proMTG。将枯草芽孢杆菌B.subtilisWB800S/proMTG发酵、纯化，得到可溶性的转谷氨酰胺酶。本发明方法可以在发酵液上清中直接获得具有生物活性的转谷氨酰胺酶，省去了繁琐的细胞破碎、纯化后激活酶原等过程，简化了发酵生产工艺。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 枯草 芽孢 杆菌 生产 谷氨酰胺 方法 | ||
【主权项】：
一株重组的枯草芽孢杆菌，其特征在于是由以下步骤构建得到：(1)构建枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800S：PCR扩增白浅灰链霉菌蛋白酶subtilisin‑like protease基因；PCR扩增P43启动子+samyQ信号肽基因；然后通过融合PCR将P43启动子+信号肽基因与subtilisin‑like protease基因连接，再将融合PCR扩增产物连接入PKS2质粒基因，最后将重组的PKS2质粒转化入枯草芽孢杆菌WB800，得到枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800S；(2)构建枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800S/proMTG：PCR扩增茂原链霉菌转谷氨酰胺酶酶原基因，然后将扩增产物连接入表达载体pBEP43中，得到融合表达质粒pBEP43‑proMTG；将质粒pBEP43‑proMTG转化入步骤(1)的枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800S中得到枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800S/proMTG；所述的枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800S/proMTG已于2011年12月31日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2011492。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华南理工大学;广州市澳键丰泽生物科技有限公司，未经华南理工大学;广州市澳键丰泽生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201210052578.2/，转载请声明来源钻瓜专利网。
