[发明专利]一种红掌苞片和花序总RNA的提取方法

摘要

本发明公开了一种红掌苞片和花序总RNA的提取方法：将幼嫩红掌苞片和花序经液氮研磨、RNA提取液63～67℃水浴静置5～8min，加入RNA提取液1/5体积的氯仿A，再次剧烈摇晃15～20s，室温下静置5～8min，离心，获得上清液，取上清液经氯仿、8M LiCl溶液处理后，离心，获得所述红掌苞片和花序总RNA；本发明最大限度地减少了有毒有害药品的使用，减轻了RNA提取对人体的危害；可以获得足量、纯净、没有DNA污染的高质量RNA；本发明方法操作简单，在短时间内得到优质产物。

主权项

一种红掌苞片和花序总RNA的提取方法，其特征在于所述方法为：(1)将幼嫩红掌苞片和花序置于研钵中液氮研磨，获得研磨干粉；(2)将装有初始RNA提取液的离心管于63～67℃水浴预热，加入所述的研磨干粉，迅速盖严并剧烈摇晃15～20s，63～67℃水浴静置5～8min，加入初始RNA提取液1/5体积的氯仿A，再次剧烈摇晃15～20s，室温下静置5～8min，离心，获得上清液A；所述初始RNA提取液由终浓度如下的组分构成：0.2g/L十六烷基三甲基溴化铵、0.2g/L聚乙烯基吡咯烷酮、0.073g/L乙二胺四乙酸、1.168g/L氯化钠、0.121g/L Tris、体积浓度0.1％的焦炭酸二乙酯和体积浓度2％的β‑巯基乙醇；(3)取上清液A，加入所述上清液A1/5体积的氯仿B剧烈摇晃15～20s后静置5～8min，离心，获得上清液B；(4)取上清液B，加入上清液B1/2体积的8M LiCl溶液，混匀，‑20℃放置5～8h，离心，收集沉淀记为沉淀A，沉淀A用体积浓度75％乙醇水溶液洗涤，离心收集沉淀记为沉淀B，沉淀B自然晾干至乙醇刚挥发完全为止，获得所述红掌苞片和花序总RNA。