[发明专利]采用复合EST-SSR标记进行大白菜品种鉴定的方法

摘要

本发明公开了一种采用复合EST-SSR标记进行大白菜品种鉴定的方法。该方法以12份大白菜杂交种的基因组DNA为模板，通过对大白菜EST序列的分析，合成了30对核心EST-SSR引物。经过筛选，得到2套标记组合完全鉴别了12份大白菜品种的差异，经田间验证试验引物稳定性良好，且与田间试验结果较为吻合，确认了这套技术和组合可以表达大白菜品种间的多态性，能够高效准确的对大白菜品种进行鉴定。本发明的检测方法在4h之内即可完成种子品种鉴定工作，具有高效、准确、低成本、操作方便等优势。可以有效的对大白菜种子真伪进行监控，保护了作物品种，防止假冒伪劣品种进入市场，也为新品种登记测试以及资源种质遗传性分析提供了有力的技术手段。

主权项

用于大白菜品种鉴定的EST‑SSR引物, 其特征在于，包括Ⅰ套或Ⅱ套EST‑SSR复合引物，其中的Ⅰ套EST‑SSR复合引物包括:BC1上游引物序列：5’‑ TTTGTCCCTATTGCTCAGGG ‑3’，BC1下游引物序列： 5’‑ CCGAGAACGTCTTCTCCTTG ‑3’；BC19上游引物序列：5’‑ TTGAAACTTGGTTGACGACG ‑3’，BC19下游引物序列： 5’‑ TTCTTCTTTGCGGCTGATTT ‑3’；BC26上游引物序列：5’‑ ATAACAACAACCTGCCCGAG ‑3’，BC26下游引物序列： 5’‑ GAAGCACAAGAACAGGGCTC ‑3’；Ⅱ套EST‑SSR复合引物，包括BC1上游引物序列：5’‑ TTTGTCCCTATTGCTCAGGG ‑3’，BC1下游引物序列： 5’‑ CCGAGAACGTCTTCTCCTTG ‑3’；BC9上游引物序列：5’‑ ACCTTCCGTCTCTGGGTCTT ‑3’，BC9下游引物序列： 5’‑ TTTTGAACGAGGTGGAGGAC ‑3’；BC10上游引物序列：5’‑ GAATCCTTTGGAAACGACGA ‑3’，BC10下游引物序列： 5’‑ GGGGACACAATTCTCCTGAA ‑3’；BC16上游引物序列：5’‑ CTTGCAAATGACCTGCTTGA ‑3’，BC16下游引物序列： 5’‑ GGGAGTTGGAGATGAGGTGA ‑3’；BC27上游引物序列：5’‑ ATCCAAAAGGAAGAATCCCG ‑3’，BC27下游引物序列： 5’‑ AAACGAGAATTTTCCTGCGA ‑3’  。