[发明专利]一种直接检测IL-6抗原的电化学免疫传感器及应用

摘要

本发明公开了一种直接检测IL-6的电化学免疫传感器及应用，所述传感器以单壁碳纳米管为基底，将金纳米粒子沉积于单壁碳纳米管上构成单壁碳纳米管/金纳米粒子杂化电极，杂化电极用巯基乙酸修饰，再在巯基乙酸上组装IL-6捕获抗体，再用质量浓度1～5％牛血清蛋白的PBS缓冲液封闭，获得所述电化学免疫传感器；本发明的电化学免疫传感器具有制备过程简便、无需标记或夹心处理、成本低廉、检测灵敏度高等优点，可广泛用于各种免疫分析和检测，且本发明制备的电化学免疫传感器对目标IL-6抗原的检测限可达到1×10-17g/ml。

主权项

一种直接检测IL‑6的电化学免疫传感器，其特征在于所述传感器按下述方法制备：(1)单壁碳纳米管：以硅片或石英片为基底，以Fe/Mo纳米粒子为催化剂，以乙醇作碳源，以氢气作为碳源的载气和保护气，于石英管中1000℃下反应15min，获得单壁碳纳米管；所述Fe/Mo纳米粒子中Fe和Mo物质的量之比为5∶1；(2)单壁碳纳米管/金纳米粒子杂化电极：将单壁碳纳米管用铜丝连接作为工作电极，以铂作为对电极，以摩尔浓度0.1～10mM HAuCl4水溶液为电解液，在电压为‑0.1V～‑0.5V下进行电化学沉积5～50s，获得单壁碳纳米管/金纳米粒子杂化电极；(3)单壁碳纳米管/金纳米粒子杂化电极的修饰：将单壁碳纳米管/金纳米粒子杂化电极浸泡在1～10mM的SHCH2COOH水溶液中，室温下浸泡3～10h，取出，用水清洗，得清洗后的电极置于EDC/NHS混合水溶液中，室温下浸泡10～30min，取出用水清洗后，获得修饰后的单壁碳纳米管/金纳米粒子杂化电极；所述EDC/NHS混合水溶液为1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)‑碳化二亚胺与N‑羟基琥珀酰亚胺的混合水溶液；(4)电化学免疫传感器：将步骤(3)获得的修饰后的单壁碳纳米管/金纳米粒子杂化电极浸泡在10～100μg/ml的IL‑6捕获抗体的PBS缓冲液中，室温下浸泡2～8h，取出，用Tween‑20水溶液和PBS缓冲液交替清洗，获得结合抗体的杂化电极，然后再将结合抗体的杂化电极浸泡在质量浓度1～5％牛血清蛋白的PBS缓冲液中，室温下浸泡0.5～2h进行封闭，取出，用Tween‑20水溶液和PBS缓冲液交替清洗，风干，获得所述的电化学免疫传感器。