[发明专利]HPLC波长切换技术测定中药制剂中多种成分含量方法

摘要

一种HPLC同时测定丹参、丹参酚酸提取物、丹参山楂药对及含丹参山楂药对的中药制剂中1-5种成分含量的方法，包括制备供试溶液和1-5种成分含量的测定。供试品溶液制备是取丹参药材0.5-1.5g，采用回流提取和提取液通过5-15gAB-8大孔吸附树脂柱，用2-5BV水以3-8V/n的洗脱后再用2-5BV30-70%乙醇以2-6BV/n的速率洗脱制成。而1-5种成分测定是取供试品溶液一份，上ODS色谱柱、用乙腈与0.1-0.5%磷酸水混合液梯度洗脱和HPLC波长切换测量丹参、丹参酚酸提取物、丹参山楂药对及含丹参山楂药对的中药制剂中1-5种成分含量。本发明既可以达到增加质量覆盖面的目的，又可以保证每种成分在最大吸收波长处被检测，提高了检测灵敏度和检测质量。

主权项

一种HPLC波长切换技术同时测定丹参、丹参酚酸提取物、丹参山楂药对及含丹参山楂药对的中药制剂中1‑5成分含量的方法，其特征在于包括下述工艺步骤：（1）、制备供试品溶液，其制备方法如下：取丹参药材0.5 g‑1.5g，精密称定，置圆底烧瓶中，加水10‑30倍量，回流提取2‑3次，每次1‑3小时，滤过，合并滤液，并浓缩，通过5‑15 g的AB‑8大孔吸附树脂柱，用2‑5BV水以3‑8BV/h的速率洗脱，弃去水洗液，用2‑5BV30‑70%乙醇以2 ‑6BV/h的速率洗脱，收集洗脱液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.0‑1.5，滤过，即得供试品溶液；或取丹参酚酸提取物、丹参山楂药对、含丹参山楂药对的中药制剂中的一种，相当于丹参药0.6‑2.6g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入30‑80%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用30‑80%甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，即得，供试品溶液；（2）、取上述制备的一份供试品溶液，上ODS色谱柱，ODS色谱柱规格为150‑250×4.6‑6.0mm,2‑5μm，梯度洗脱；洗脱液为乙腈与0.1%‑0.5%磷酸水混合液；第一梯度洗脱采用乙腈5—10%：磷酸水95—90%的混合液，第二梯度洗脱采用乙腈10—15%：磷酸水90—85%的混合液，第三梯度洗脱采用乙腈15—18%：磷酸水85—72%的混合液；第四梯度洗脱采用乙腈18—18%：磷酸水72—72%的混合液；第五梯度洗脱采用乙腈18—40%：磷酸水72—67%的混合液；  洗脱液流速为0.8‑1.2ml/min；检测波长：第一时间段为280nm，第二时间段为330nm，第三时间段为286nm,可依次测定并计算出丹参、丹参酚酸提取物、丹参山楂药对及含丹参山楂药对的中药制剂中1‑5种成分的含量，在上述色谱条件下，理论塔板数以丹酚酸B计不低于10000，分离度＞1.5。