[发明专利]一种检测十四种常见致病菌的复合基因芯片及方法

摘要

本发明涉及基因芯片及方法，本发明针对十四种常见致病菌的特异性鉴别靶基因设计相应的引物和探针，构建复合基因芯片；使用生物素标记引物，再将引物以PCR方法来扩增被检测物质的靶基因片段，扩增产物与复合基因芯片上的探针杂交，通过引物和探针双重特异性检测，复合物在复合基因表面沉积，使特定的分子杂交转变成可视信号，从而检测不同产毒微生物。本发明能检测14种常见致病菌，检测通量高、特异性强、灵敏度好、快速有效。

主权项

一种检测十四种常见致病菌的复合基因芯片，其特征在于，所述复合基因芯片上整合了如下探针：用于检测金黄色葡萄球菌的靶基因FemA的探针：金黄色葡萄球菌1探针，其序列为GCT CAC TAT TTG CTT GGC TTT G，金黄色葡萄球菌2探针，其序列为TTT GAC TCT CAT TCAAAT GTT G；用于检测沙门氏菌的靶基因invA的探针：沙门氏菌探针，其序列为AAT AAG ACC GGC CTT CTA GG；用于检测空肠弯曲菌的靶基因VS1的探针：空肠弯曲菌1探针，其序列为TGAAAG TGA TAG CGC TAGACA G，空肠弯曲菌2探针，其序列为AAC TAT TAG GCT CTT GGA GGC T；用于检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的靶基因ail的探针：小肠结肠炎耶尔森氏菌1探针，其序列为AGC AAT TGC CAG TTA TCC AT，小肠结肠炎耶尔森氏菌2探针，其序列为TGG AGC AAC ATT GAT GAA CA；用于检测副溶血性弧菌的靶基因tlh的探针：副溶血性弧菌1探针，其序列为ATC TGC ACAAGC ACT AAG CG，副溶血性弧菌2探针，其序列为GAT GGC ACG CAA CAT TCC AC；用于检测霍乱弧菌的靶基因ompW的探针：霍乱弧菌1探针，其序列为GTG TAC TAATTG TCC GCA CC，霍乱弧菌2探针，其序列为TAC CAC TAC TTG GAA GCA AG；用于检测肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7的靶基因rfbE的探针：O157:H7探针，其序列为GTGAAC TGAACG GCA CCA TC；用于检测腊样芽孢杆菌的靶基因16s rRNA‑b的探针：腊样芽孢杆探针，其序列为TGC TAC GCA TTG GCA CTG GCA CCT；用于检测产气荚膜梭菌的靶基因CPα的探针：产气荚膜梭菌探针，其序列为TAC TAG TTG TAT TAG GCT CC；用于检测志贺氏菌的靶基因ipaH的探针：志贺氏菌1探针，其序列为CAT TTC TGC CGA CGC AGT CA，志贺氏菌2探针，其序列为CAC ATC TTG CAA TCT GCA GA；用于检测单核增生李斯特氏菌的靶基因prfA的探针：单核增生李斯特氏菌探针，其序列为GAT TAC TAA GCA CCA TGG CT；用于检测肉毒梭菌的靶基因16s rRNA‑c的探针：肉毒梭菌探针，其序列为TATACC TAGACAATC TCATT；用于检测黄曲霉、寄生曲霉的靶基因Nor的探针：黄曲霉/寄生曲霉Nor1探针，其序列为ATC ATA CTG TCT GCA AGC TG，黄曲霉/寄生曲霉Nor2探针，其序列为GGT TTC TGC CCAATA CAG GA；用于检测黄曲霉、寄生曲霉的靶基因omt的探针：黄曲霉/寄生曲霉omt1探针，其序列为GAG AAC CCA TCC AAG GCA TG，黄曲霉/寄生曲霉omt2探针，其序列为CCT TAC TTC CTC GCA AAG AA。