[发明专利]指导华法林使用起始剂量快速基因分型的方法和试剂盒

摘要

本发明公开了指导华法林使用起始剂量快速基因分型的方法和试剂盒，属于生物医学领域临床检测技术中的基因检测技术。一种快速基因分型的方法，通过提取宿主细胞基因组DNA，测定受试者的CYP2C9*3(1061 A/C)和VKORC1(-1639 G/A)的基因型。本发明中CYP2C9*3(1061 A/C)和VKORC1(-1639 G/A)基因的具有SEQ ID 1所示的核酸序列位点，是与华法林代谢相关的最主要的两个位点之一。本发明的优点是：提供了一种能快速准确的基因分型方法及相关试剂盒，该方法快速，操作简单，成本低廉可用于血栓性相关疾病的预防、辅助诊断和治疗，便于基层医疗机构的开展及普及应用。

主权项

一种指导华法林使用起始剂量快速基因分型的方法，该方法通过提取受试者外周血细胞的基因组DNA特异性的扩增出CYP2C9*3(1061 A/C)和VKORC1(‑1639 G/A)位点的扩增产物，扩增产物在进行熔解曲线分析过程中随着温度逐渐升高，使扩增产物的DNA解链，荧光染料从局部解链的DNA分子上释放，通过检测荧光信号随温度的变化即可得到扩增产物的熔解曲线，根据熔解曲线的形状从而可以判断是否存在突变位点以及突变位点的基因型，所采用的引物具有序列表SEQ ID 2和5所示的碱基序列：其中SEQ ID 2和3所示序列为CYP2C9*3(1061 A/C)位点F和R引物序列，SEQ ID 4和5所示序列为VKORC1(‑1639 G/A)位点F和R引物序列。