[发明专利]基于同源重组的核酸分子克隆方法及相关试剂盒在审

专利信息
申请号: 201210090049.1 申请日: 2012-03-30
公开(公告)号: CN102634534A 公开(公告)日: 2012-08-15
发明(设计)人: 于浩洋 申请(专利权)人: 深圳市中联生物科技开发有限公司
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 孔青;郭文洁
地址: 518002 中国深圳市*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 本申请提供基于同源重组的核酸分子克隆方法。按照本申请的方法,通过提供两端添加有分别与目标DNA两端序列或其侧翼序列同源的序列(即目标DNA特异性同源臂)的线性化载体,或者利用同时含有目标DNA特异性同源臂和载体特异性同源臂(与载体特定区域同源的序列)的连接片段,将目标DNA通过同源重组克隆到载体中。本申请的方法尤其适用于大DNA片段的克隆和单核苷酸多态性研究。本申请还提供相关的试剂盒。
搜索关键词: 基于 同源 重组 核酸 分子 克隆 方法 相关 试剂盒
【主权项】:
将目标DNA克隆到载体中的方法,包括:(a) 将第一序列和第二序列分别添加到线性化载体的两端,其中第一序列与目标DNA的第一末端或其侧翼序列同源的序列,第二序列与目标DNA的第二末端或其侧翼序列同源的序列,获得两端分别具有第一序列和第二序列的延长的线性化载体,所述第一序列和第二序列各自独立地长至少12个核苷酸,优选15‑50个核苷酸,更优选35‑50个核苷酸;(b) 使延长的线性化载体与含有目标DNA的样品接触,通过同源重组将目标DNA克隆到载体中。
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