[发明专利]一种污染土壤遗传毒性的原位检测方法

摘要

一种污染土壤遗传毒性的原位检测方法，土壤样品不需固液萃取和分离，而直接利用检测遗传毒性的生物传感细胞进行检测，首先将生物传感细胞接种至新鲜培养基培养，使其达到对数增长期，得到细胞悬浊液；然后称取预设质量的土样风干、研磨后，与预设体积的去离子水混合，制备土壤样品悬浊液；随后将细胞悬浮液与土壤样品悬浊液混合，读取并记录混合液的化学发光值；最后定义诱导倍数(IR)＝某一时刻污染土样的发光强度/相同时刻阴性对照土样的发光强度；若IR＞1，则该土壤样品具有遗传毒性；本方法能降低土壤样品遗传毒性评价的不确定性、减少成本，更准确的评价土壤介质的真实毒性、并且可以将污染物的暴露途径与其毒性相关联，具有很大的科学和应用价值。

主权项

一种污染土壤遗传毒性的原位检测方法，其特征在于：土壤样品不需固液萃取和分离，而直接利用检测遗传毒性的生物传感细胞进行检测，包括如下步骤：步骤1：生物传感细胞的培养与准备：将生物传感细胞接种至新鲜培养基培养，使其达到对数增长期，得到细胞悬浊液；步骤2：土壤样品的准备：将土壤样品风干、研磨过10目筛后，称取预设质量的样品，与预设体积的去离子水混合，制备土壤样品悬浊液；步骤3：样品遗传毒性测试：将步骤1中制备的细胞悬浮液与步骤2制备的土壤样品悬浊液混合，使用能够读取化学发光的发光检测仪或多功能酶标仪，每隔5‑30min读取并记录混合液的化学发光值lum；步骤4：数据处理：对于待测土壤样品，定义诱导倍数(IR)＝某一时刻污染土样的发光强度/相同时刻阴性对照土样的发光强度；若显著性检验IR＞1，则认为该土壤样品具有遗传毒性；在相同剂量下，IR越高，土壤样品的遗传毒性越强；在相同IR下，称取的土壤剂量越小，土壤样品的遗传毒性越强。