[发明专利]一种改进的CLIP法鉴定RNA结合蛋白的靶标RNA的方法无效
| 申请号： | 201210100749.4 | 申请日： | 2012-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN102628038A | 公开（公告）日： | 2012-08-08 |
| 发明（设计）人： | 张翼;付向东;吴同彬;薛愿超;邵长伟;黄晨 | 申请（专利权）人： | 武汉生命之美科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 薛玲 |
| 地址： | 430079 湖北省武汉市洪山*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种紫外交联-免疫共沉淀法鉴定RNA结合蛋白的靶标RNA方法，该方法采用微球菌核酸酶（micrococcalnuclease）来替代RNaseA和RNaseT1来做不完全酶解，通过酶解结束后通过去除溶液中的钙离子（Ca2+）即使该核酸酶完全失活。此外在酶解结束后采用先连接5’RNAlinker再连接3’RNAlinker的方式来给靶标RNA的两端加上接头。本发明使用微球菌核酸酶作部分RNA消解，有效地减少了靶标RNA的降解；采用先连接5’RNAlinker的方案，克服了可能存在的蛋白复合物在3’端形成的空间位阻，提高了CLIP技术的成功率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 改进 clip 鉴定 rna 结合 蛋白 靶标 方法 | ||
【主权项】：
微球菌核酸酶在紫外交联‑免疫共沉淀技术中的应用。
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