[发明专利]基于物理化学相结合的新型多糖硫酸化方法

摘要

本发明的目的在于提供一种采用化学物理结合的手段进行多糖硫酸化生产的工艺，本发明实施的步骤是：1、纯化而获得均一纯品多糖；2、硫酸化试剂的制备；3、微波辅助法；4、红外检测；5、SD检测；6、体外抗氧化活性的检测。这种工艺可以达到传统工艺的硫酸化程度，而且保持了较高的生物学活性，同时大大缩短了硫酸化的时间。

主权项

基于物理化学相结合的新型多糖硫酸化方法，其特征在于按以下步骤进行：1)以香菇多糖作为参与反应的底物，香菇胞外多糖通过气升式发酵产生的发酵液中提取，纯化而获得的均一纯品多糖；2)硫酸化试剂的制备：采用取代率较高的硫酸化体系——氯磺酸‑吡啶体系：将氯磺酸缓慢滴加到装有吡啶的容器中，滴加过程应在冰盐浴中进行，并用磁力搅拌器搅拌，控制温度在0摄氏度至4摄氏度以防过热；3)微波辅助法：将纯品多糖溶解在甲酰胺中，硫酸化试剂缓慢滴加，搅拌均匀，利用微波炉进行反应，反应结束后，混合液调节至pH中性，并用酒精沉淀，离心复溶于水，浓缩透析，冻干，获得硫酸化产品；4)红外检测：KBr压片法傅立叶红外光谱仪检测，400‑4000cm‑1观察硫酸取代的特殊峰；5)SD检测：碳水化合物含量的检测采用苯酚硫酸法，硫酸根含量的检测采用氯化钡明胶法；6)体外抗氧化活性的检测超氧根自由基清除能力：模拟黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应体系产生超氧阴离子自由基，加入电子传递物质和griess显色剂，在550nm比色，测试管中加入不同浓度的样品，计算样品的超氧阴离子清除能力；氢氧根自由基清除能力：利用fenton反应产生羟自由基，给与电子受体后，用griess显色，550nm比色，测试管中加入不同浓度的样品，计算样品的羟基阴离子清除能力。